大鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）Elisa試劑盒

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)Elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

規(guī)格：48T   96T

檢 測(cè) 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標(biāo) 本 要 求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標(biāo)記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過(guò)氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)Elisa試劑盒操作步驟
 ①抗原包被過(guò)夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過(guò)夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí)：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 
⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍(lán)色。 
⑨終止反應(yīng)、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下：

小鼠膀胱癌細(xì)胞    MB49
小鼠胚胎成骨細(xì)胞    MC3T3-E1
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞    MEF
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞    MEF
小鼠前胃癌細(xì)胞    MFC
小鼠肝上皮細(xì)胞    NCTC clone 1469
小鼠正常肝細(xì)胞    NCTC1469
小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞    neuro-2a
小鼠胚胎細(xì)胞    NIH/3T3
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞    OP9
小鼠畸胎瘤細(xì)胞    P19
小鼠白血病細(xì)胞    P388
小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝株    PT-67
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞    RAW 264.7
小鼠腎癌細(xì)胞    RENCA
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞    RGC-5
小鼠雜交瘤    SDOW-17
小鼠胚胎干細(xì)胞    SOX1-GFP
小鼠骨髓瘤細(xì)胞    Sp2/0
小鼠骨髓瘤細(xì)胞    Sp2/0-Ag14
小鼠腎小球系膜細(xì)胞    SV40-MES-13
小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞    SVEC4-10
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞    TM3
正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞    TM4
小鼠子宮頸癌細(xì)胞    U14
小鼠淋巴瘤細(xì)胞    YAC-1
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞    MC38
小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞    STC-1
大鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞    muller
大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞    A7r5
大鼠肝細(xì)胞    BRL-3A
大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞    C6
大鼠肝星形細(xì)胞    CFSC-8B
大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞    CTX
大鼠腦I型星形膠質(zhì)細(xì)胞    CTX-TNA
大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞    DI TNC1
大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞    DRG
大鼠垂體瘤細(xì)胞    GH3
大鼠心肌細(xì)胞    H9C2 
大鼠心肌細(xì)胞    H9c2(2-1)
大鼠腎小球系膜細(xì)胞    HBZY-1
永生型大鼠肝儲(chǔ)脂細(xì)胞    HSC-T6
大鼠回腸細(xì)胞    IEC-18
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞    IEC-6
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞    IEC-6  BHS 
大鼠乳腺癌細(xì)胞    MADB106
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞    NR8383
大鼠腎細(xì)胞    NRK-52E
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 低分化     PC12低分化
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 高分化     PC12高分化
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化     PC12未分化
大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞    RBL-2H3
大鼠肝癌細(xì)胞    RH-35
大鼠β胰島素瘤細(xì)胞    RIN-m5f
倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞    BHK-21
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞    CHL
倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞     CHO
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞k1 亞克隆系     CHO-K1
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞    CTLA4 IG-24
倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞    LEC-1
倉(cāng)鼠肺細(xì)胞    V79
豬肺泡巨噬細(xì)胞    3D4/21