詳細(xì)介紹
大鼠脫氧吡啶酚啶啉Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠脫氧吡啶酚啶啉Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過(guò)氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
操作步驟
①抗原包被過(guò)夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過(guò)夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開(kāi)始),100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS01518B 人抗高爾基體抗體(AGAA)Elisa試劑盒
YS01519B 人沙眼衣原體(CT)Elisa試劑盒
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YS01521B 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)Elisa試劑盒
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YS01525B 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)Elisa試劑盒
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YS01527B 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)Elisa試劑盒
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YS01531B 人抗狂犬病毒抗體(anti-RV)Elisa試劑盒
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YS01537B 人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)Elisa試劑盒
YS01538B 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)Elisa試劑盒
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YS01540B 人腺相關(guān)病毒(AAV)Elisa試劑盒
YS01541B 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)Elisa試劑盒
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YS01543B 人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)Elisa試劑盒
YS01544B 人麻疹病毒(MV)Elisa試劑盒
YS01545B 人流行性腮腺炎(EP)Elisa試劑盒
YS01546B 人抗流行性出血熱病毒抗體IgG(EHF)Elisa試劑盒
YS01548B 人萊姆IgG(Lyme-IgG)Elisa試劑盒
YS01549B 人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)Elisa試劑盒
YS01550B 人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)Elisa試劑盒
YS01551B 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)Elisa試劑盒
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YS01558B 人白色念珠菌(C.albicans)Elisa試劑盒
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YS01560B 人冠狀病毒(Coronaviruses)Elisa試劑盒
YS01561B 人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)Elisa試劑盒
YS01562B 人沙眼衣原體抗體(CT)Elisa試劑盒
YS01563B 人血吸蟲(chóng)抗體IgG(Sch-IgG)Elisa試劑盒
YS01564B 人輪狀病毒抗原(RV-Ag)Elisa試劑盒
YS01565B 人軍團(tuán)菌抗原(LP-Ag)Elisa試劑盒
YS01566B 人大腸菌素(colicin)Elisa試劑盒
YS01567B 人腺病毒抗原(ADV-Ag)Elisa試劑盒
YS01568B 人旋毛蟲(chóng)抗體(TrichinellaAb)Elisa試劑盒
YS01569B 人破傷風(fēng)抗體(TetanusAb)Elisa試劑盒
YS01570B 人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)Elisa試劑盒
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YS01572B 人阿米巴(Amebiasis)Elisa試劑盒
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YS01574B 人囊蟲(chóng)病抗體(CYTAb)Elisa試劑盒
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YS01578B 人軍團(tuán)菌抗體IgA(LPAb-IgA)Elisa試劑盒
YS01579B 人軍團(tuán)菌抗體IgM(LPAb-IgM)Elisa試劑盒
YS01580B 人軍團(tuán)菌抗體IgG(LPAb-IgG)Elisa試劑盒
YS01583B 人EB病毒IgM(EBv-IgM)Elisa試劑盒
YS01584B 人EB病毒IgA(EBv-IgA)Elisa試劑盒
YS01585B 人EB病毒IgG(EBv-IgG)Elisa試劑盒
YS01586B 人利什曼原蟲(chóng)抗體(Leishimaria-Ab)Elisa試劑盒
YS01587B 人登革熱抗體(DF-Ab)Elisa試劑盒
YS01588B 人流感病毒抗體IgG(FLU)Elisa試劑盒
YS01589B 人腺病毒抗體(ADV-Ab)Elisa試劑盒
YS01590B 人腺病毒IgG(ADV-IgG)Elisa試劑盒