詳細(xì)介紹
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS01591B 人輪狀病毒(RV)Elisa試劑盒
YS01592B 人艾柯病毒IgM(ECHO-IgM)Elisa試劑盒
YS01593B 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)Elisa試劑盒
YS01594B 人麻疹病毒IgM(MV-IgM)Elisa試劑盒
YS01595B 人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)Elisa試劑盒
YS01596B 人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)Elisa試劑盒
YS01597B 人結(jié)核菌桿抗體(TB-Ab)Elisa試劑盒
YS01598B 人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)Elisa試劑盒
YS01599B 人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2-Ab)Elisa試劑盒
YS01600B 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2-Ag)Elisa試劑盒
YS01601B 人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)Elisa試劑盒
YS01602B 人辛型肝炎病毒((TTV)Elisa試劑盒
YS01603B 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)Elisa試劑盒
YS01604B 人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)Elisa試劑盒
YS01605B 人丁型肝炎IgM(HDV-IgM)Elisa試劑盒
YS01606B 人丁型肝炎IgG(HDV-IgG)Elisa試劑盒
YS01607B 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)Elisa試劑盒
YS01608B 人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)Elisa試劑盒
YS01609B 人糖蛋白130(gp130)Elisa試劑盒
YS01610B 人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)Elisa試劑盒
YS01611B 人去氨加壓素(dDAVP)Elisa試劑盒
YS01612B 人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChRM3)Elisa試劑盒
YS01613B 人睪酮受體(TR)Elisa試劑盒
YS01614B 人毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)Elisa試劑盒
YS01615B 人糖蛋白49A(Gp49a)Elisa試劑盒
YS01616B 人抑制素β-B(Inhbb)Elisa試劑盒
YS01617B 人食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒
YS01618B 人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)Elisa試劑盒
YS01619B 人鈣調(diào)素(CAM)Elisa試劑盒
YS01620B 人真胰島素(TI)Elisa試劑盒
YS01621B 人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)Elisa試劑盒
YS01622B 人前列環(huán)素(PGI)Elisa試劑盒
YS01623B 人降鈣素原(PCT)Elisa試劑盒
YS01624B 人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)Elisa試劑盒
YS01625B 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)Elisa試劑盒
YS01626B 人戊糖素(Pentosidine)Elisa試劑盒
YS01627B 人變腎上腺素(MN)Elisa試劑盒
YS01628B 人多巴胺D1受體(D1R)Elisa試劑盒
YS01629B 人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)Elisa試劑盒
YS01630B 人早老素2(PS-2)Elisa試劑盒
YS01631B 人異丙腎上腺素(iso-Hyd)Elisa試劑盒
YS01632B 人胰抑制素(Pancreastatin)Elisa試劑盒
YS01633B 人雄激素受體(AR)Elisa試劑盒
YS01634B 人松弛肽/松弛素(RLN)Elisa試劑盒
YS01635B 人生長激素結(jié)合蛋白(GHBP)Elisa試劑盒
YS01636B 人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)Elisa試劑盒
YS01637B 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)Elisa試劑盒
YS01638B 人硫酸褪黑色素(MS)Elisa試劑盒
YS01639B 人長效甲狀腺刺激素(LATS)Elisa試劑盒
YS01640B 人抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)Elisa試劑盒
YS01641B 人甘丙肽/甘丙素(GAL)Elisa試劑盒
YS01642B 人促胰液素/分泌素受體(SR)Elisa試劑盒
YS01643B 人雌激素受體(ER)Elisa試劑盒
YS01644B 人超敏生長激素(US-GH)Elisa試劑盒
YS01645B 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)Elisa試劑盒
YS01646B 人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)Elisa試劑盒
YS01647B 人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)Elisa試劑盒
YS01649B 人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)Elisa試劑盒
YS01650B 人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)Elisa試劑盒
YS01651B 人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)Elisa試劑盒
YS01652B 人黃體生成素釋放激素(LHRH)Elisa試劑盒
YS01653B 人8異前列腺素(8-iso-PG)Elisa試劑盒
YS01654B 人腎素(Renin)Elisa試劑盒