詳細(xì)介紹
大鼠P53(P53)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠P53(P53)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠P53(P53)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價(jià)待測樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價(jià)。
大鼠P53(P53)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS01654B 人腎素(Renin)Elisa試劑盒
YS01655B 人腎上腺素(EPI)Elisa試劑盒
YS01656B 人雌二醇受體(ER)Elisa試劑盒
YS01657B 人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)Elisa試劑盒
YS01658B 人血管緊張素原(aGT)Elisa試劑盒
YS01659B 人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)Elisa試劑盒
YS01660B 人卵泡抑素(FS)Elisa試劑盒
YS01661B 人甲狀腺素抗體(TAb)Elisa試劑盒
YS01662B 人兒茶酚胺(CA)Elisa試劑盒
YS01663B 人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)Elisa試劑盒
YS01664B 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)Elisa試劑盒
YS01665B 人5羥色胺(5-HT)Elisa試劑盒
YS01666B 人抑制素A(INH-A)Elisa試劑盒
YS01667B 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)Elisa試劑盒
YS01668B 人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)Elisa試劑盒
YS01669B 人脫氫表雄酮(DHEA)Elisa試劑盒
YS01670B 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)Elisa試劑盒
YS01671B 人生長抑素(SS)Elisa試劑盒
YS01672B 人生長激素釋放多肽(GHRP)Elisa試劑盒
YS01673B 人抑制素B(INH-B)Elisa試劑盒
YS01674B 人促甲狀腺素釋放激素(TRH)Elisa試劑盒
YS01675B 人雌激素(E)Elisa試劑盒
YS01676B 人褪黑素(MT)Elisa試劑盒
YS01677B 人6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa試劑盒
YS01678B 人血栓素B2(TXB2)Elisa試劑盒
YS01679B 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)Elisa試劑盒
YS01680B 人前列腺素E2(PGE2)Elisa試劑盒
YS01681B 人雙氫睪酮(DHT)Elisa試劑盒
YS01682B 人促生長激素釋放激素(GHRH)Elisa試劑盒
YS01683B 人孕激素/孕酮(PROG)Elisa試劑盒
YS01684B 人超敏游離雌三醇(uE3)Elisa試劑盒
YS01685B 人去甲腎上腺素(NA)Elisa試劑盒
YS01686B 人前列腺素F(PGF)Elisa試劑盒
YS01687B 人前列腺素E1(PGE1)Elisa試劑盒
YS01688B 人內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa試劑盒
YS01689B 人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒
YS01690B 人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒
YS01691B 人大內(nèi)皮素(BigET)Elisa試劑盒
YS01692B 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)Elisa試劑盒
YS01693B 人降鈣素(CT)Elisa試劑盒
YS01694B 人促甲狀腺素(TSH)Elisa試劑盒
YS01695B 人皮質(zhì)醇(Cortisol)Elisa試劑盒
YS01696B 人雌二醇(E2)Elisa試劑盒
YS01697B 人脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)Elisa試劑盒
YS01698B 人睪酮(T)Elisa試劑盒
YS01699B 人游離睪酮(F-TESTO)Elisa試劑盒
YS01700B 人雄烯二酮(ASD)Elisa試劑盒
YS01701B 人雌三醇(E3)Elisa試劑盒
YS01702B 人17羥孕酮(17-OHP)Elisa試劑盒
YS01703B 人三碘甲狀腺原氨酸(T3)Elisa試劑盒
YS01704B 人甲狀腺素(T4)Elisa試劑盒
YS01705B 人游離甲狀腺素(FT4)Elisa試劑盒
YS01706B 人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)Elisa試劑盒
YS01707B 人新生甲狀腺素(NN-T4)Elisa試劑盒
YS01708B 人胰島素(INS)Elisa試劑盒
YS01709B 人C肽(C-Peptide)Elisa試劑盒
YS01710B 人絨毛膜促性腺激素(HCG)Elisa試劑盒
YS01711B 人絨毛膜促性腺激素β(β-CG)Elisa試劑盒
YS01712B 人促黃體激素(LH)Elisa試劑盒
YS01713B 人潑尼松龍(PS)Elisa試劑盒
YS01714B 人瘦素(LEP)Elisa試劑盒
YS01715B 人苗條素受體(LR/Ob-R)Elisa試劑盒
YS01716B 人生長激素(HGH)Elisa試劑盒
YS01717B 人紅細(xì)胞生成素(EPO)Elisa試劑盒
YS01718B 人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)Elisa試劑盒