詳細(xì)介紹
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎(AFP)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能
馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎(AFP)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎(AFP)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎(AFP)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS01718B 人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)Elisa試劑盒
YS01719B 人β微管蛋白(TUBB)Elisa試劑盒
YS01720B 人前列腺素F2α(PGF2α)Elisa試劑盒
YS01721B 人總前列腺特異抗原(tPSA)Elisa試劑盒
YS01722B 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)Elisa試劑盒
YS01723B 人解脲脲原體抗體(UU-Ab)Elisa試劑盒
YS01724B 人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)Elisa試劑盒
YS01725B 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)Elisa試劑盒
YS01726B 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2(EIP-PS2)Elisa試劑盒
YS01727B 人細(xì)菌性陰道病(BV)Elisa試劑盒
YS01728B 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)Elisa試劑盒
YS01729B 人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)Elisa試劑盒
YS01730B 人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)Elisa試劑盒
YS01731B 人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)Elisa試劑盒
YS01732B 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)Elisa試劑盒
YS01733B 人前列腺特異性抗原(PSA)Elisa試劑盒
YS01734B 人磷脂酰絲氨酸(PS)Elisa試劑盒
YS01735B 人膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)Elisa試劑盒
YS01736B 人總膽汁酸(TBA)Elisa試劑盒
YS01737B 人載脂蛋白C3(ApoC3)Elisa試劑盒
YS01738B 人膽固醇(CH)Elisa試劑盒
YS01739B
YS01740B 人金屬硫蛋白2(MT2)Elisa試劑盒
YS01741B 人3硝基酪氨酸(3-NT)Elisa試劑盒
YS01742B 人糖胺聚糖(GAG)Elisa試劑盒
YS01743B 人半胱氨酰白三烯(CysLTs)Elisa試劑盒
YS01744B 人鈣腔蛋白(CALU)Elisa試劑盒
YS01745B 人載脂蛋白A5(apo-A5)Elisa試劑盒
YS01746B 人維生素D結(jié)合蛋白(DBP)Elisa試劑盒
YS01747B 人硒蛋白1(SEP1)Elisa試劑盒
YS01748B 人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)Elisa試劑盒
YS01749B 人鳥苷酸結(jié)合蛋白4(Gbp4)Elisa試劑盒
YS01750B 人細(xì)胞色素b561(cytb561)Elisa試劑盒
YS01751B 人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)Elisa試劑盒
YS01752B 人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)Elisa試劑盒
YS01753B 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)Elisa試劑盒
YS01754B 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)Elisa試劑盒
YS01755B 人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)Elisa試劑盒
YS01756B 人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)Elisa試劑盒
YS01757B 人羥賴氨酸(Hyl)Elisa試劑盒
YS01758B 人GTP酶活化蛋白(GAP)Elisa試劑盒
YS01759B 人載脂蛋白H(Apo-H)Elisa試劑盒
YS01760B 人糖磷脂酰肌醇(GPI)Elisa試劑盒
YS01761B 人美洲商陸素(PWM)Elisa試劑盒
YS01762B 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)Elisa試劑盒
YS01763B 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)Elisa試劑盒
YS01764B 人載脂蛋白E(Apo-E)Elisa試劑盒
YS01765B 人成骨生長肽(OGP)Elisa試劑盒
YS01766B 人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)Elisa試劑盒
YS01767B 人羥基膠原吡啶交聯(lián)(OH-PYD)Elisa試劑盒
YS01768B 人脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)Elisa試劑盒
YS01769B 人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)Elisa試劑盒
YS01770B 人葡萄球菌蛋白A(SPA)Elisa試劑盒
YS01771B 人刀豆素A(ConA)Elisa試劑盒
YS01772B 人游離原卟啉(FEP)Elisa試劑盒
YS01773B 人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)Elisa試劑盒
YS01774B 人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)Elisa試劑盒
YS01775B 人谷胱甘肽(GSH)Elisa試劑盒
YS01776B 人17酮類固醇(17-KS)Elisa試劑盒
YS01777B 人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)Elisa試劑盒
YS01778B 人組織蛋白酶K(cath-K)Elisa試劑盒