詳細(xì)介紹
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS01908B 人單胺氧化酶(MAO)Elisa試劑盒
YS01909B 人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)Elisa試劑盒
YS01910B 人二胺氧化酶(DAO)Elisa試劑盒
YS01911B 人環(huán)加氧酶2(COX-2)Elisa試劑盒
YS01912B 人周期素依賴性激酶5(CDK5)Elisa試劑盒
YS01913B 人激肽釋放酶10(KLK10)Elisa試劑盒
YS01914B 人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ1)Elisa試劑盒
YS01915B 人神經(jīng)氨酸酶(NA)Elisa試劑盒
YS01916B 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)Elisa試劑盒
YS01917B 人磷酯酶C(PLC)Elisa試劑盒
YS01918B 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)Elisa試劑盒
YS01919B 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)Elisa試劑盒
YS01920B 人整合素連接激酶1(ILK-1)Elisa試劑盒
YS01921B 人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)Elisa試劑盒
YS01922B 人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)Elisa試劑盒
YS01923B 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)Elisa試劑盒
YS01924B 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)Elisa試劑盒
YS01925B 人絲氨酸蛋白酶(PRSS)Elisa試劑盒
YS01926B 人脾臟酪氨酸激酶(Syk)Elisa試劑盒
YS01927B 人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)Elisa試劑盒
YS01928B 人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)Elisa試劑盒
YS01929B 人尿激酶(UK)Elisa試劑盒
YS01930B 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)Elisa試劑盒
YS01931B 人胰蛋白酶(trypsin)Elisa試劑盒
YS01932B 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)Elisa試劑盒
YS01933B 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)Elisa試劑盒
YS01934B 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)Elisa試劑盒
YS01935B 人山梨醇脫氫酶(SDH)Elisa試劑盒
YS01936B 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)Elisa試劑盒
YS01937B 人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)Elisa試劑盒
YS01938B 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)Elisa試劑盒
YS01939B 人蛋白磷酸酶(PP)Elisa試劑盒
YS01940B 人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)Elisa試劑盒
YS01941B 人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)Elisa試劑盒
YS01942B 人彈性蛋白酶(Elastase)Elisa試劑盒
YS01943B 人α淀粉酶(AMS/AMY)Elisa試劑盒
YS01944B 人堿性磷酸酶(ALP)Elisa試劑盒
YS01945B 人天青殺素(AZU)Elisa試劑盒
YS01946B 人血管緊張肽酶A(ATA)Elisa試劑盒
YS01947B 人胰淀粉酶(PAMY)Elisa試劑盒
YS01948B 人α烯醇化酶(αENOL)Elisa試劑盒
YS01949B 人膠原酶II(CollagenaseII)Elisa試劑盒
YS01950B 人膠原酶I(CollagenaseI)Elisa試劑盒
YS01951B 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)Elisa試劑盒
YS01952B 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)Elisa試劑盒
YS01953B 人乙酰膽堿酯酶(AChE)Elisa試劑盒
YS01954B 人葡萄糖氧化酶(GOD)Elisa試劑盒
YS01955B 人酪氨酸羥化酶(TH)Elisa試劑盒
YS01956B 人多巴胺脫羧酶(DDC)Elisa試劑盒
YS01957B 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)Elisa試劑盒
YS01958B 人多巴胺β羥化酶(DBH)Elisa試劑盒
YS01959B 人膽堿乙?;?CHAc)Elisa試劑盒
YS01960B 人異檸檬酸脫氫酶(ICD)Elisa試劑盒
YS01961B 人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)Elisa試劑盒
YS01962B 人腺苷脫氨酶(ADA)Elisa試劑盒
YS01963B 人透明質(zhì)酸酶(HAase)Elisa試劑盒
YS01964B 人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)Elisa試劑盒
YS01965B 人酸性磷酸酶(ACP)Elisa試劑盒
YS01966B 人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)Elisa試劑盒
YS01967B 人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)Elisa試劑盒
YS01968B 人亮氨酰氨基肽酶(LAP)Elisa試劑盒
YS01969B 人鏈激酶(SK)Elisa試劑盒
YS01970B 人核糖核酸酶(RNASE)Elisa試劑盒
YS01971B 人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)Elisa試劑盒