大鼠25羥基維生素D3Elisa試劑盒

大鼠25羥基維生素D3Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

規(guī)格：48T   96T

檢 測(cè) 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標(biāo) 本 要 求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠25羥基維生素D3Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標(biāo)記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過(guò)氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

操作步驟
 ①抗原包被過(guò)夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過(guò)夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí)：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開(kāi)始)，100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，已知樣品作為陽(yáng)性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 
⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍(lán)色。 
⑨終止反應(yīng)、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽(yáng)性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。

相關(guān)產(chǎn)品如下：

YS01972B    人芳基硫酸酯酶A(ASA)Elisa試劑盒
YS01973B    人對(duì)氧磷酶(PON)Elisa試劑盒
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YS01981B    人β半乳糖苷酶(βGAL)Elisa試劑盒
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YS01983B    人α2抗纖溶酶(α2-AP)Elisa試劑盒
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YS01985B    人L苯丙氨酸解氨酶(PAL)Elisa試劑盒
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YS01989B    人靶向核糖核酸酶(TR)Elisa試劑盒
YS01990B    人蛋白激酶C(PKC)Elisa試劑盒
YS01991B    人醛縮酶(ALD)Elisa試劑盒
YS01992B    人L乳酸脫氫酶(L-LDH)Elisa試劑盒
YS01993B    人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)Elisa試劑盒
YS01994B    人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)Elisa試劑盒
YS01995B    人5脂加氧酶(5-LO/LOX)Elisa試劑盒
YS01996B    人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)Elisa試劑盒
YS01997B    人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)Elisa試劑盒
YS01998B    人鳥(niǎo)氨酸脫羧酶(ODC)Elisa試劑盒
YS01999B    人蛋白酪氨酸激酶(PTK)Elisa試劑盒
YS02000B    人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)Elisa試劑盒
YS02001B    人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)Elisa試劑盒
YS02002B    人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMNElastase)Elisa試劑盒
YS02004B    人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)Elisa試劑盒
YS02005B    人激肽釋放酶8(KLK8)Elisa試劑盒
YS02006B    人激肽釋放酶6(KLK6)Elisa試劑盒
YS02007B    人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)Elisa試劑盒
YS02008B    人組織蛋白酶D(cath-D)Elisa試劑盒
YS02009B    人激素敏感性脂肪酶(HSL)Elisa試劑盒
YS02010B    人胰激肽原酶(PK)Elisa試劑盒
YS02011B    人烏頭酸酶2(ACO-2)Elisa試劑盒
YS02012B    人26S蛋白酶體(26SPSM)Elisa試劑盒
YS02013B    人周期素依賴性激酶4(CDK-4)Elisa試劑盒
YS02014B    人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)Elisa試劑盒
YS02015B    人受體酪氨酸激酶(RTKs)Elisa試劑盒
YS02016B    人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)Elisa試劑盒
YS02017B    人溶菌酶(LZM)Elisa試劑盒
YS02018B    人黏著斑激酶(FAK)Elisa試劑盒
YS02019B    人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)Elisa試劑盒
YS02020B    人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)Elisa試劑盒
YS02021B    人精氨酸酶(Arg)Elisa試劑盒
YS02022B    人中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)Elisa試劑盒
YS02023B    人間變性淋巴瘤激酶(ALK)Elisa試劑盒
YS02024B    人激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)Elisa試劑盒
YS02025B    人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)Elisa試劑盒
YS02026B    人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因(GSTpi)Elisa試劑盒
YS02027B    人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)Elisa試劑盒
YS02028B    人泛素分解酶(DUB)Elisa試劑盒
YS02029B    人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)Elisa試劑盒
YS02030B    人泛素連接酶(E3/UBPL)Elisa試劑盒
YS02031B    人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)Elisa試劑盒
YS02032B    人多巴色素異構(gòu)酶(DT)Elisa試劑盒
YS02033B    人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)Elisa試劑盒
YS02034B    人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)Elisa試劑盒
YS02035B    人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)Elisa試劑盒
YS02036B    人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)Elisa試劑盒
YS02037B    人泛素激活酶(E1/UBAE)Elisa試劑盒
YS02038B    人胃蛋白酶(PP)Elisa試劑盒
YS02039B    人己糖激酶(HK)Elisa試劑盒
YS02040B    人丙酮酸脫氫酶E1(PDHE1)Elisa試劑盒