詳細介紹
大鼠乙酰膽堿(Ach)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠乙酰膽堿(Ach)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原: IgG
②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠乙酰膽堿(Ach)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色。
⑨終止反應、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠乙酰膽堿(Ach)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS02040B 人丙酮酸脫氫酶E1(PDHE1)Elisa試劑盒
YS02041B 人糖原合成酶激酶(GSK)Elisa試劑盒
YS02042B 人胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒
YS02043B 人胱天蛋白酶3(Casp-3)Elisa試劑盒
YS02044B 人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)Elisa試劑盒
YS02045B 人碳酸酐酶2(CA-2)Elisa試劑盒
YS02046B 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)Elisa試劑盒
YS02047B 人髓過氧化物酶(MPO)Elisa試劑盒
YS02048B 人顆粒酶B(Gzms-B)Elisa試劑盒
YS02049B 人顆粒酶A(Gzms-A)Elisa試劑盒
YS02050B 人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)Elisa試劑盒
YS02051B 人超氧化物歧化酶(SOD)Elisa試劑盒
YS02052B 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)Elisa試劑盒
YS02053B 人組織蛋白去乙酰化酶(HD)Elisa試劑盒
YS02054B 人甲基化酶(Methylase)Elisa試劑盒
YS02055B 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)Elisa試劑盒
YS02056B 人磷酸肌醇3激酶(PI3K)Elisa試劑盒
YS02057B 人蛋白激酶B(PKB)Elisa試劑盒
YS02058B 人血紅素氧合酶2(HO-2)Elisa試劑盒
YS02059B 人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)Elisa試劑盒
YS02060B 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)Elisa試劑盒
YS02061B 人αL巖藻糖苷酶(AFU)Elisa試劑盒
YS02062B 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)Elisa試劑盒
YS02063B 人血紅素氧合酶1(HO-1)Elisa試劑盒
YS02064B 人誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)Elisa試劑盒
YS02065B 人磷脂酶A2(PL-A2)Elisa試劑盒
YS02066B 人一氧化氮合成酶(NOS)Elisa試劑盒
YS02067B 人端粒酶(TE)Elisa試劑盒
YS02068B 人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)Elisa試劑盒
YS02069B 人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)Elisa試劑盒
YS02070B 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)Elisa試劑盒
YS02071B 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)Elisa試劑盒
YS02072B 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)Elisa試劑盒
YS02073B 人前列腺酸性磷酸酶(PAP)Elisa試劑盒
YS02074B 人前列腺素D合成酶(PGDS)Elisa試劑盒
YS02075B 人胃蛋白酶原C(PG-C)Elisa試劑盒
YS02076B 人胃蛋白酶原A(PG-A)Elisa試劑盒
YS02077B 人尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)Elisa試劑盒
YS02078B 人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)Elisa試劑盒
YS02079B 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)Elisa試劑盒
YS02080B 人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)Elisa試劑盒
YS02081B 人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)Elisa試劑盒
YS02082B 人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)Elisa試劑盒
YS02083B 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)Elisa試劑盒
YS02084B 人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)Elisa試劑盒
YS02085B 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)Elisa試劑盒
YS02086B 人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)Elisa試劑盒
YS02087B 人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)Elisa試劑盒