化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格：48T 96T
檢 測 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原： IgG
②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液（CBS）：Na2CO3 0.8g，NaHCO3 1.46g，水溶解，定容500ml。
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4 4g，Na2HPO4·12H2O 58g，NaCl 160g， KCl 4g，Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液：2mol/L H2SO4
操作步驟
①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。
③洗滌：用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。
⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次，
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標(biāo)儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值，陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
相關(guān)產(chǎn)品如下：
YS07007B 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07008B 小鼠C型鈉尿肽(CNP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07009B 小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07010B 小鼠同型半胱氨酸(Hcy)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07011B 小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07012B 小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07013B 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07014B 小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) 酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07015B 小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07016B 小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07017B 小鼠阿立新A(Orexin A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07018B 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07019B 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07020B 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07021B 小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07022B 小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07023B 小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07024B 小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07025B 小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07026B 小鼠血清一氧化氮(NO)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07027B 小鼠apelin 12(AP12)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07028B 小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07029B 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07030B 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07031B 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07032B 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07033B 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07034B 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07035B 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07036B 小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07037B 小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07038B 小鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07039B 小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07040B 小鼠肌球蛋白(Myosin)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07041B 小鼠結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07042B 小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07043B 小鼠組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07044B 小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07045B 小鼠維生素D(VD)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07046B 小鼠維生素K1(VK1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS07047B 小鼠維生素B12(VB12)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
化工儀器網(wǎng)