詳細介紹
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標 本 要 求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標記抗體
①抗原: IgG
②酶標抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時:采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍色。
⑨終止反應、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標儀測定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)Elisa試劑盒相關產(chǎn)品如下:
YS06924B 小鼠干細胞因子受體(SCFR)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06925B 小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06926B 小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06927B 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06928B 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06929B 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06930B 小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06931B 小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06932B 小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06933B 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06934B 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06935B 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06936B 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06937B 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06938B 小鼠白介素12(IL-12/P40)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06939B 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06940B 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06941B 小鼠肝細胞生長因子(HGF)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06942B 小鼠生長因子(GH)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06943B 小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06944B 小鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06945B 小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06946B 小鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06947B 小鼠紅細胞生成素受體(EPOR)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06948B 小鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06949B 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06950B 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06951B 小鼠血管生成素2(ANG-2)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06952B 小鼠血管生成素1(ANG-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06953B 小鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06954B 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06955B 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06956B 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06957B 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06958B 小鼠血小板生成素(TPO)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06959B 小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06960B 小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06961B 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06962B 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06963B 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06964B 小鼠白介素17(IL-17)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06965B 小鼠白介素12(IL-12/P70)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒