詳細(xì)介紹
大鼠雌三醇(E3)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
規(guī)格:48T 96T
檢 測(cè) 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本試劑盒用于測(cè)定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。
標(biāo) 本 要 求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠雌三醇(E3)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原: IgG
②酶標(biāo)抗抗體:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封閉液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷蘭牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗滌液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗滌液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液):稱NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸餾水溶解,定容至1000mL,調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液:稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混勻,加100mL 底物緩沖液,在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL過氧化氫(H2O2)加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,TMB:H2O2=1:1混勻。
7. 終止液:2mol/L H2SO4
大鼠雌三醇(E3)Elisa試劑盒操作步驟
①抗原包被過夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原濃度 (N為板數(shù))
②封閉:棄上清 加300μL/孔封閉液,37℃放置2h。
③洗滌:用洗滌液洗3次
④加一抗(待測(cè)樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品血清(1:200稀釋于1%BSA+PBST中)作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。 測(cè)免疫效價(jià)待測(cè)樣品為小鼠血清時(shí):采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1:200開始),100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份,小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,已知樣品作為陽性對(duì)照。37℃恒溫箱溫育2h。
⑤洗滌:用洗滌液洗5次。
⑥加二抗(酶標(biāo)抗抗體):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀釋,100μL/孔, 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌:用洗滌液洗5次,
⑧顯色:加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒溫箱放置10min,顯示藍(lán)色。
⑨終止反應(yīng)、比色:加30μL/孔H2SO4終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm 630nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測(cè)樣品的效價(jià)。
大鼠雌三醇(E3)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
YS06717B 兔子膠原酶I(Collagenase I)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06718B 兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06719B 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06720B 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06721B 豚鼠白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06722B 豚鼠免疫球蛋白G(IgG)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06723B 豚鼠血清總補(bǔ)體(CH50)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06724B 豚鼠組胺(HIS)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06725B 豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06726B 豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06727B 豚鼠生長激素(GH)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06728B 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06729B 豚鼠免疫球蛋白A(IgA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06730B 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06731B 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06732B 豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06733B 豚鼠端粒酶(TE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06734B 豚鼠促卵泡素(FSH)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06735B 豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06736B 豚鼠表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06737B 豚鼠白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06738B 豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06739B 豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06740B 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06741B 豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06742B 豚鼠白三烯D4(LTD4)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06743B 豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06744B 豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06745B 豚鼠白介素12(IL-12/P70)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06746B 豚鼠血清一氧化氮(NO)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06747B 豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06748B 豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06749B 豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06750B 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06751B 豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06752B 豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06753B 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06754B 豬白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06755B 豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06756B 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06757B 豬α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06758B 豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06759B 豬γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06760B 豬白介素8(IL-8/CXCL8)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06761B 豬白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06762B 豬白介素1β (IL-1β)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06763B 豬白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06764B 豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒
YS06765B 豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒