化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒是以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法
需要但未提供的材料及耗材
1、酶標儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
【適用儀器】
半自動的酶標儀，如Thermo MK3，或者國產(chǎn)酶標儀。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在- 20℃以下，避免反復凍融。
2、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下，可以儲存72h，或者在- 20℃儲存6個月。樣本收集后，不是一次檢測完，請按一次用量分裝凍存，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復到室溫（平衡1小時），標準品、質(zhì)控品和樣品，建議做復孔。
2、按前面試劑準備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置標準品孔、樣本孔和空白孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL，樣本孔加待測樣本50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，標準品孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL。
6、用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。
8、如此重復4次（共洗板5次）。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應板。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD值）。
【檢驗結(jié)果的解釋】
檢測完成后，以標準品濃度做為縱坐標，對應的吸光度（OD值）作為橫坐標，利用計算機軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標準曲線方程，通過樣本的吸光度（OD值），利用方程計算樣品的濃度值。
如果樣品被稀釋，通過上述方法測的的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的zui終濃度。
【檢驗方法的局限性】
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于zui高標準品濃度值，請將樣本適當稀釋后，再重新測定。
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果，檢測前，請排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。
【產(chǎn)品性能指標】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝，無破損漏氣。
2、劑量反應曲線線性
校準品劑量反應曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。
3、精密度
批內(nèi)精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行二十次在同一個板塊內(nèi)精度評估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。
批間精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行二十次在不同板塊內(nèi)精度評估。批間變異系數(shù)CV%小于15%。
4、靈敏度
zui低檢出劑量小于1.0mIU/L。
5、回收率
三組已知的高、中、低濃度樣品，進行五次回收率評估，回收率在85%-115%之間。
6、特異性
本試劑盒識別天然和重組豬胰島素（INS），與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
7、穩(wěn)定性
客戶須知:
1、液體類標本（細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等）。
2、樣本保存：請盡早檢測，2-8℃保存一天；需更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本，請將樣本及時分裝標號后，置-20℃或-70℃保存；
3、請?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測指標及其他特殊要求。
購買豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒承諾：
1.有質(zhì)量問題免費包換，合同上注明了的.（質(zhì)量問題包括運輸不當，客戶在使用過程中測不出結(jié)果，等等?。?nbsp;
2.全程技術(shù)指導。（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析，有任何疑問，我們技術(shù)都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務。（你只需把標本寄過來，我們?yōu)槟愎?jié)省時間，幫你出結(jié)果，原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務。
【儲存條件及有效期】
1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個月。
2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
3、開封后，按照建議的條件保存，校準品、包被微孔板和HRP標記抗體，有效期為14天，其他成分在標簽標明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）測試盒（測紅細胞） 100管/30樣 盒 比色法
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PD）測試盒（連續(xù)監(jiān)測法） R1：40ml×1
R2：10ml×1 盒 紫外比色法
白蛋白測試盒（帶標準；溴甲酚綠法） 100管/96樣 盒 比色法
96T 盒 微板法
銅藍蛋白（CP）測試盒（測血清，除雞血清） 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸（Hyp）測試盒（消化法） 測培養(yǎng)細胞、
培養(yǎng)液 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸（Hyp）測試盒（堿水解法） 測動物血清、
組織、尿液 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸（Hyp）測試盒（酸水解法） 經(jīng)典法 50管/48樣 盒 比色法
－N－乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）測試盒 50管/24樣 盒 比色法
肌酸激酶（CK）測試盒 50管/24樣 盒 比色法
脂褐質(zhì)（LF）測試盒 50管/48樣 盒 熒光光度法
單胺氧化酶（MAO）測試盒 50管/48樣 盒 紫外比色法
D－木糖測試盒 50管/48樣 盒 比色法
唾液酸（SA）測試盒（帶SA標準） 50管/48樣 盒 比色法
唾液酸（SA）測試盒（酶法，雙試劑） 96T 盒 微板法
糖化血清蛋白（GSP）測試盒（果糖胺法）（帶標準） 25管/24樣 盒 比色法
50管/48樣 盒 比色法
糖化血清蛋白（GSP）試劑盒（NBT法） 96T 盒 微板法
亞硝酸鹽測試盒 100管/96樣 盒 比色法
血清鐵測試盒 50管/48樣 盒 比色法
組織鐵測試盒 50管/48樣 盒 比色法
總鐵結(jié)合力（TIBC）測試盒 50管/48樣 盒 比色法
5’－核苷酸酶（5’-NT）測試盒 100管/48樣 盒 比色法
5’－核苷酸酶（5’-NT）測試盒（酶比色法） 96T 盒 微板法
游離脂肪酸（NEFA）測試盒 50管/48樣 盒 比色法
游離脂肪酸（NEFA）測試盒（酶法，雙試劑） 96T 盒 微板法
肝/肌糖原測試盒 50管/48樣 盒 比色法
髓過氧化物酶（MPO）測試盒 100管/48樣 盒 比色法
總蛋白定量測試盒（帶標準；雙縮脲法） 100管/96樣 盒 比色法
總蛋白定量測試盒（帶標準；考馬斯亮藍法） 50管/48樣 盒 比色法
100管/96樣 盒 比色法
總蛋白定量測試盒（帶標準；BCA法） 50管/48樣 盒 比色法
100管/96樣 盒 比色法
化工儀器網(wǎng)