豬熱休克蛋白90（HSP-90）Elisa試劑盒

豬熱休克蛋白90（HSP-90）Elisa試劑盒化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性

豬熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法

需要但未提供的材料及耗材
  1、酶標(biāo)儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
 
【適用儀器】
  半自動(dòng)的酶標(biāo)儀，如Thermo MK3，或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀。
 
【樣本要求】
  樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。
2、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
 
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下，可以儲(chǔ)存72h，或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月。樣本收集后，不是一次檢測(cè)完，請(qǐng)按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。
豬熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫（平衡1小時(shí)），標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加待測(cè)樣本50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
6、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。
8、如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）。
 
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
檢測(cè)完成后，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的吸光度（OD值）作為橫坐標(biāo)，利用計(jì)算機(jī)軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，通過樣本的吸光度（OD值），利用方程計(jì)算樣品的濃度值。
如果樣品被稀釋，通過上述方法測(cè)的的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的zui終濃度。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后，再重新測(cè)定。
6、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，檢測(cè)前，請(qǐng)排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無破損漏氣。
2、劑量反應(yīng)曲線線性
校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。
3、精密度
批內(nèi)精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。
批間精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估。批間變異系數(shù)CV%小于15%。
4、靈敏度
zui低檢出劑量小于1.0mIU/L。
5、回收率
三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行五次回收率評(píng)估，回收率在85%-115%之間。
6、特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組豬胰島素（INS），與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
7、穩(wěn)定性

客戶須知:

1、液體類標(biāo)本（細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等）。
2、樣本保存：請(qǐng)盡早檢測(cè)，2-8℃保存一天；需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本，請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后，置-20℃或-70℃保存；
3、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求。

購(gòu)買豬熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒承諾： 

1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換，合同上注明了的.（質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng)，客戶在使用過程中測(cè)不出結(jié)果，等等?。?nbsp;
2.全程技術(shù)指導(dǎo)。（包括售前的標(biāo)本收集，使用過程中不明白的地方，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析，有任何疑問，我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電） 
3.提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。（你只需把標(biāo)本寄過來，我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間，幫你出結(jié)果，原始數(shù)據(jù)，分析數(shù)據(jù)均可提供，一般時(shí)間是5天左右） 
4.客戶有任何問題，我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠(chéng)為客戶服務(wù)。

【儲(chǔ)存條件及有效期】
  1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個(gè)月。
  2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
  3、開封后，按照建議的條件保存，校準(zhǔn)品、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體，有效期為14天，其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
豬熱休克蛋白90(HSP-90)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

檸檬酸合成酶（CS）活性測(cè)試盒    20T    盒    比色法
    50T    盒    比色法
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（25ml）    盒    比色法
甘油三酯（TG）測(cè)定試劑盒（單試劑GPO-PAP法）
（分光光度計(jì)）    100管/96樣
（100ml）    盒    比色法
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（酶標(biāo)儀及生化分析儀）    96T
（25ml）    盒    比色法
總膽固醇（TC）測(cè)定試劑盒（單試劑GPO-PAP法）
（分光光度計(jì)）
    100管/96樣
（100ml）    盒    比色法
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（25ml）    盒    比色法
高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測(cè)定試劑盒
（雙試劑直接法）（分光光度計(jì)）
    100管/96樣
（100ml）    盒    比色法
低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測(cè)定試劑盒
（雙試劑直接法）（酶標(biāo)儀及生化分析儀）    96T
（25ml）    盒    比色法
低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測(cè)定試劑盒
（雙試劑直接法）（分光光度計(jì)）
    100管/96樣
（100ml）    盒    比色法
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輔酶ⅡNADP（H）含量測(cè)試盒    50T/24樣    盒    比色法
NADH氧化酶（NOX）測(cè)試盒    50T/48樣    盒    比色法
NAD激酶（NADK）測(cè)試盒    50T/24樣    盒    比色法
硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）測(cè)試盒    100T/48樣    盒    紫外比色法
硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測(cè)試盒    50T/48樣    盒    比色法
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谷氨酸脫氫酶（GDH）測(cè)試盒    50T/48樣    盒    紫外比色法
半胱氨酸（Cys）含量測(cè)試盒    50T/48樣    盒    比色法
NADPH氧化酶活性測(cè)試盒    20T    盒    比色法
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磷酸果糖激酶（PFK）測(cè)試盒    50T/48樣    盒    紫外比色法
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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）試劑盒    50T/48樣    盒    紫外比色法
NADPH-細(xì)胞色素C還原酶（NCR）測(cè)試盒    50T/48樣    盒    比色法