大腸桿菌BL21 Star（DE3）化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

大腸桿菌BL21 Star（DE3）化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞送鑒定報(bào)告采用先用胰蛋白酶短時(shí)間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來，細(xì)胞總量T25瓶；細(xì)胞經(jīng)堿性磷酸酶染色和茜素紅染色鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品及特點(diǎn)
BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞來源于 BL21(DE3)菌株，由特殊工藝制作，使用 pUC19
質(zhì)粒檢測本產(chǎn)品，轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107cfu/μg。
BL21 Star(DE3)菌株的特點(diǎn)是含有 rne131 基因突變體。rne131 突變基因能夠增強(qiáng)
菌株細(xì)胞內(nèi) mRNA 的穩(wěn)定性，從而有效提高蛋白表達(dá)能力。本產(chǎn)品主要適用于 T7 啟動子
表達(dá)載體(如 pET 系列)的高水平蛋白表達(dá)。
菌株基因型為：F- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm rne131(DE3)

規(guī)格及成分 成分 編號 塑料袋包裝

本產(chǎn)品 150801 0.1 mL×10
使用手冊 1 份

運(yùn)輸及保存 干冰運(yùn)輸、-80℃保存，有效期半年。
自備試劑 目的 DNA、LB 培養(yǎng)基等
使用方法 1. 從-80℃冰箱中取出BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，置于冰上解凍。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為
50-100μL，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。
以下實(shí)驗(yàn)以 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 取 100μL 冰上融化的 BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上
靜置 25 分鐘。
3. 42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
4. 向離心管中加入 700μL 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(LB)，混勻后 37℃，200rpm 復(fù)蘇
60 分鐘。
5. 取 100μL 左右菌液涂布于含相應(yīng)抗生素的 LB 培養(yǎng)基上。如果轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒，可
以減少涂布的量。
6. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞參考文獻(xiàn)
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RNase E Polypeptides Lacking a Carboxyl-terminal Half Suppress a mukB
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C-terminal Half of RNase E, Which Organizes the Escherichia coli
Degradosome, Participates in mRNA Degradation but not rRNA Processing in
vivo. Mol. Microbiol. 33, 188-199. 
BL21 Star(DE3)感受態(tài)細(xì)胞關(guān)聯(lián)產(chǎn)品
BL21 (DE3)感受態(tài)細(xì)胞（CAT#：90505），BL21 (DE3) pLysS 感受態(tài)細(xì)胞（CAT#：
90507）