小鼠成纖維細胞系

小鼠成纖維細胞系產(chǎn)品特點：

復旦大學中山醫(yī)院肝癌研究所在研究MHCC97時發(fā)現(xiàn)其是異質(zhì)性很強的細胞群。部分細胞有很強的致瘤性和轉移力，而部分則較弱。因此分離建立了高低轉移性不同的肝癌細胞株MHCC97-H和MHCC97-L。據(jù)報道MHCC97-H存在較高的干細胞樣的側群細胞（sp）。肝癌SP細胞具有*的致瘤性，并可能和肝癌轉移潛能相關。再用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠，進行3次肺轉移篩選，取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉移的肝癌細胞系MHCC97-LM3。

規(guī)格：5×105cells/瓶
培養(yǎng)條件：37℃，5% CO2，PH值7.2~7.4，無菌恒溫培養(yǎng)。
細胞數(shù)量：1× 106個
細胞傳代：1:4~1:6傳代；每周換液2~3次
細胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM（高糖） +10% FBS；37℃，5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細胞凍存：液氮凍存?????

T25瓶細胞處理方法

收到小鼠成纖維細胞系后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱*培養(yǎng)基（含1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

②若細胞密度較大，達到80%以上，將細胞傳代培養(yǎng)。

注：

培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。（這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況，如果原來FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）   收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題，請當天反饋并提供圖片，且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋，細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因導致可根據(jù)實際情況酌情處理；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格，不予免費售后。