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技術(shù)文章

elisa檢測試劑盒實驗標本的作用及比例

閱讀:328          發(fā)布時間:2018-10-18

      在朋友們操作elisa檢測試劑盒實驗時,關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系,大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul血清或血漿,今天跟您說說實驗標本的作用及比例。

    受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,買前要和技術(shù)人員詳細溝通,有些產(chǎn)品分類很細,同一個項目會有幾個試劑盒。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保存其免疫學(xué)活性,又保存酶的活性。

      由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。需要的樣本量取決于你的檢測項目,有些檢測項目需要血清做1:100稀釋,甚至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項目只能做較低的稀釋,甚至不稀釋,這樣的話每孔會需要100 ul左右。

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