詳細(xì)介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Histophilus somniPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
普羅威登斯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
偽牛痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
SAPAP3: PSD95結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
ERC1: RAB6蛋白抗體 0.2ml
壞死因子-β抗體 Anti-TNF-β 0.1ml
Anti-TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記壞死因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Jak3 (Tyr785) 0酸化蛋白酪JAK-3抗體 規(guī)格 0.1ml
BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒 ,英文名: Peosidine ELISA Kit
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA檢測試劑盒MouseActivinAELISAKit 96T/48T
人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫試劑盒 Human ai-fibrillarin aibody,AFA/snoRNP/U3RNP ELISA Kit
RatdipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4%多聚甲固著液50毫升
Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISA試劑盒小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
睡眠嗜組織菌PCR檢測試劑盒ORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) 0酸化β抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ASK1(Ser1033) 0酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)1抗體 規(guī)格 0.1ml
Tubulin-alpha 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UGP2 英文名稱: 尿苷酰二0酸葡萄糖焦0化酶2抗體 0.2ml
DNAJC7 英文名稱: DNAJC7蛋白抗體 0.2ml
Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) 0酸化β抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。