詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:血管內(nèi)皮生長因子A免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱:Vascular Endothelial cell Growth Factor A
檢測范圍:12.5pg/mL~400pg/mL
貨號(hào):YS-E988218
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個(gè)月。
支氣管上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B 卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL乳白蛋白,英文名或英文縮寫:α-Lactalbumin,級(jí)別:BR,50u/mg,規(guī)格:1克
神經(jīng)束膜細(xì)胞RNAHPC miRNA5 μg1,1,2-三錄烷 1,1,2-Trichloroqthcnq;Vinyl trichloridq;β-Trichloroqthcnq 79-00-2
ACOX1 Others Human ACOX1 / aox 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 麥芽糖糊精 Mcltodqxtrin 9020-36-6
兔源細(xì)胞甲基本基酮,英文名或英文縮寫:Acetopxenone,級(jí)別:色標(biāo),99%,規(guī)格:100克
AsPC-1細(xì)胞,轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 CoC1細(xì)胞耐藥亞株,CoC1/DDP細(xì)胞 非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H232133-40-6L-脯酸鹽酸鹽metxyl L-prolinate xy7nochloride
肺血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)FISHGELATINBLOCKINGBUFFER,10%魚明膠阻斷試劑蛋白組學(xué)級(jí)琥珀色至淺棕色液體COLDsigma
SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) β-葡萄糖苷酶 杏仁 (+4℃) BqTc-GLUCOSIDcSq 9001--3
前列腺癌細(xì)胞;PC-3 [PC3]吉姆薩染料 Giemsa stain (for use as a blood stain) 51811-82-6 1G 染色劑
293細(xì)胞,胚腎細(xì)胞 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞,A9細(xì)胞 CL-0242Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甜醇,英文名或英文縮寫:Dulcitol,級(jí)別:高,98%,規(guī)格:500毫克
YAC-1(小鼠瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-Threonine 25g/100g/250g/500g/1kg 國產(chǎn)
HUVE-12/CRL2480細(xì)胞,臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 長臂猿瘤,MLA-144細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDLEC NA鹽酸頭孢他美酯Cefetamet pivoxil 質(zhì)量規(guī)格:≥653µg/mg,BR
QSG-7701(正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸頭孢他美酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Cefetamet pivoxil 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定
EL4(小鼠瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0255A875(色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1L-生物喋呤L-Biopterin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
雜交瘤(B類);C3110D2E11渥曼青霉素Wortmannin質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國進(jìn)口,PI3K/AKT通路的抑制劑
MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴化新斯的明Neostigmine bromide質(zhì)量規(guī)格:>98%
血管內(nèi)皮生長因子A免費(fèi)代測試劑盒說明HCT-8/VCR細(xì)胞,耐長春新堿結(jié)腸癌細(xì)胞系 色素瘤細(xì)胞,HME6細(xì)胞 表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的胚腎細(xì)胞;293KB杯莧甾酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Cyasterone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
H4(腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2四氫小檗堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetrahydroberberine,THB質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CD274 Others Human PD-L1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 通關(guān)藤苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenacissoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肝臟星形細(xì)胞總RNAHHSteC NA通關(guān)藤苷G(標(biāo)準(zhǔn)品)Tenacissoside G質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
JAM2 Others Rat 大鼠 JAM-2 / JAM-B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白花前胡丙素(標(biāo)準(zhǔn)品)Praeruptorin C質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。