通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用
產(chǎn)品名稱 | 測(cè)定方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
丙二醛(MDA)試劑盒 | 微量法、可見(jiàn)分光光度法 | 100管/96樣 、50管/48樣 | YS-01J6357 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過(guò)氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。
測(cè)定原理:
MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有最大吸收峰,進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過(guò)氧化脂質(zhì)的含量;同時(shí)測(cè)定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計(jì)算MDA的含量。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)顆粒 英文名稱:Nutrient Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)顆粒 英文名稱:Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:300ml*10
平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)顆粒 英文名稱:Plate Count Agar 產(chǎn)品規(guī)格:300ml/袋*10
GN增菌液顆粒 英文名稱:Gram Negative Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
氯化鈉蛋白胨緩沖液顆粒 英文名稱:Buffered Sodium Chloride Peptone Solution 產(chǎn)品規(guī)格:250g
MLCB寒天培地顆粒 英文名稱:MLCB Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基 (TSB)(顆粒) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(顆粒) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
緩沖蛋白胨(BPW)顆粒 英文名稱:Buffered Peptone Water 產(chǎn)品規(guī)格:300ml/袋*10
丙二醛(MDA)試劑盒84650-60-2茶多(UV98%) 規(guī)格: 20mg
177931-17-8三白草 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
6199-67-3B 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
甲酰原 規(guī)格: 20mg
88901-36-4羅漢果ⅴ;Mogroside V 規(guī)格: 20mg
33289-85-9川續(xù)斷皂乙 規(guī)格: 20mg
野百合 規(guī)格: 20mg
二氫兩面針 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
298-81-7花椒 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
磺胺 規(guī)格: 100mg