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詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱：神經(jīng)酰胺免費(fèi)代測試劑盒
英文名稱：ceramide
檢測范圍：5μmol/L~160μmol/L
貨號(hào)：YS-E987961
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（270ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期：6個(gè)月。
表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLO-去甲基加蘭他敏質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口O-Desmethyl Galanthamine
CFSC-2G細(xì)胞，大鼠肝星形細(xì)胞 7721(7721肝癌細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6O-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 (His 標(biāo)簽)異吉非羅齊（吉非羅齊雜質(zhì)）質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)
Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細(xì)胞白血病;L1210吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6
山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1N-去甲基昂丹司瓊質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Demethyl Ondansetron
BCAM Others Human BCAM 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) GENEPAGE29:1,4.5%*CLDPAK* 4.5% GENE-PAGE 29:1, 6 M 尿素生物技術(shù)級(jí)5X100MLCOLD
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL二酰氧基典本 (Diccqtoxyiodo)bqnzqnq 340-34-4
THP1-Blue (穩(wěn)定株)單核細(xì)胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME亮安醋腦非肽;L-酪安酰甘安酰甘安酰-L-本炳安酰-L-柏安醋;柏安醋腦非肽 Lqucinq qnkqphclin;[5-Lqucinq] qnkqphclin;qnkqphclin L;[Lqu5]qnkqphclin 81678-16-
IL17A Protein Human 重組 IL17 / IL17A 蛋白UREA,8MSOLUTION尿素蛋白組學(xué)級(jí)250ML57-13-6COLD
脈絡(luò)絲成纖維細(xì)胞 (HCPF)( 5×105 ) HUVEC, 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 Caco-2，結(jié)直腸腺癌細(xì)胞2645-8-1N-本甲?；?/span>-L-精酸乙酯鹽酸鹽etxyl N-benzoyl-L-argininate xy7nochloride
臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(膀胱癌細(xì)胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]霉酚酸β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 霉酚酸?；?/span> β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC阿莫西林-d4Amoxicillin-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
MME Others Cynomolgus 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿莫西林三水合物Amoxicillin trihydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化);COS-1 [COS1]二氫非諾貝特Dihydro Fenofibrate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
神經(jīng)酰胺免費(fèi)代測試劑盒BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2雷洛昔芬-d4Raloxifene-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CPE Others Human CPE 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 雷洛昔芬6-葡萄糖苷酸Raloxifene 6-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
多聚賴氨酸10 mg/mlPLL(+)-兒茶素水合物(+)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,進(jìn)分
CRELD2 Others Mouse 小鼠 CRELD2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (+)-兒茶素水合物（標(biāo)準(zhǔn)品）(+)-Catechin hydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2(+)-兒茶素（標(biāo)準(zhǔn)品）(+)-Catechin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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