測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
商品介紹:
測(cè)定意義:
PEPC(EC 4.1.1.31)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸與二氧化碳反應(yīng)生成草酰乙酸呈不可逆反應(yīng)的酶,對(duì)三羧酸循環(huán)的運(yùn)轉(zhuǎn)起重要調(diào)節(jié)作用。
測(cè)定原理:
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,蘋(píng)果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋(píng)果酸和NAD+,在340nm測(cè)定NADH減少速率,計(jì)算PEPC活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
兔神經(jīng)肽Y受體Y5(NPYR5)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔神經(jīng)激肽A(NKA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔丙酮酸脫氫α(PDHα)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔磷酸肌-3-激催化亞基β肽(PIK3Cβ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔胱天激活的脫氧核糖核酸(CAD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔半乳凝集素2(GAL2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔磷脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔12羥基二十烷四烯酸(12-HETE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔磷酸肌-3-激2α肽(PI3K2α)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔蛋白激B(PKB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔橋粒斑蛋白(DSP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
兔集落刺激因子2受體β (CSF2Rβ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)測(cè)試盒10284-63-6D-松 規(guī)格: ≥95;20mg
518-28-5鬼臼 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
520-36-5芹菜;Apigenin 規(guī)格: 20mg
64820-99-1牡荊鼠李糖 規(guī)格: 20mg
胰激肽原 規(guī)格: 約329單位
28434-00-6烯丙;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 規(guī)格: 0.1g
22338-71-2遠(yuǎn)志 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
黃芩 規(guī)格: 0.5g
546-97-4古倫賓 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
524-17-4蝙蝠葛 規(guī)格: 20mg