測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
產(chǎn)品名稱 | 測(cè)定方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
中性蛋白酶測(cè)試盒 | 微量法、可見(jiàn)分光光度法 | 100管/48樣、50管/24樣 | BJ-01S85371 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
NP在一定的溫度和中性pH條件下,催化水解蛋白質(zhì)。由于其安全無(wú)毒、水解能力強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn),中性蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營(yíng)養(yǎng)品。
測(cè)定原理:
中性條件下,NP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);在680nm有特征吸收峰。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1.5 mL EP管和蒸餾水
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
膀胱平滑肌細(xì)胞 1×106 5×106
腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 1×106 5×106
腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 1×106 5×106
內(nèi)膜上皮細(xì)胞 1×106 5×106
卵巢顆粒細(xì)胞 1×106 5×106
SMC兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞1ml/T75
HUV-EC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞1ml/T75
HPASMC人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞1ml/T75
ES-2人胃癌細(xì)胞1ml/T75
MGC-803人胃癌細(xì)胞1ml/T75
BGC-823人胃腺癌細(xì)胞1ml/T75
SGC-7901人胃腺癌細(xì)胞1ml/T75
AGS人胃腺癌細(xì)胞1ml/T75
CW-2人結(jié)腸癌細(xì)胞1ml/T75
中性蛋白酶測(cè)試盒哥倫比亞瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 規(guī)格: 13.2g/300ml
62025-49-4人參皂F2;Ginseside F 規(guī)格: 20mg
30220-46-3巨大戟 規(guī)格: 20mg
巖黃連 規(guī)格: 1g
60207-31-0氧環(huán)唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 規(guī)格: 0.1g
34152藜蘆 規(guī)格: 20mg
二甲磺阿米三嗪 規(guī)格: 100mg
476-32-4白屈菜 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
1617-90-9長(zhǎng)春胺 規(guī)格: 20mg
23180-57-6芍藥 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial