詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):牛呼吸道合胞體病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Bovine Respiartory Syncytial Virus(BRSV)RTPCR
規(guī)格:50T
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
脊髓灰質(zhì)炎病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒
脊髓灰質(zhì)炎病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒
脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
FGF1: 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
大腸埃希桿菌O抗體 Anti-EPEC-IgG O 0.2ml
Anti-PEA15/FITC 熒光素標(biāo)記星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr181) 0酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
rec Protein A/FITC 熒光素標(biāo)記重組化蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
小鼠原鈣黏素15(PCDH15)ELISA試劑盒 ,英文名: PCDH15 ELISA Kit
猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T
犬基質(zhì)金屬13(MMP-13)免疫試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
英文名稱(chēng)HumanAngiotensinIconveingenzymeELISAKit人血管緊張素I轉(zhuǎn)化酶(ACE)規(guī)格:96T/48T
化線(xiàn)粒體氧化酶活性測(cè)定試劑盒20次
RatIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒大鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
牛呼吸道合胞體病毒PCR檢測(cè)試劑盒61281-38-7五味子甲素 schisandrin A 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S試劑盒20
61281-37-6五味子乙素說(shuō)明書(shū) Schizandrin B 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit
61276-17-3毛蕊花糖苷 acteoside 豬組胺(HIS)試劑盒 Porcine Histamine ELISA Kit
611-71-2苦杏仁酸 Mandelic acid 豬組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒PorcineHistamine,HISELISAKit 96T/48T
611-40-5射干苷說(shuō)明書(shū) Tectoridin 豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)試劑盒 Pig ansferrin receptor,TFR ELISA Kit
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。