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詳細(xì)介紹
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：
14℃或－20℃
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)SPS基因染料法qPCR試劑盒 |
英文名稱 | Standard qPCR kit for SPS gene in Rice |
貨號 | YSP96952 |
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
反應(yīng)五要素:
產(chǎn)品僅用于科研參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Bile saltactivated lipase 膽激活脂肪酶 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml ROBININ
Bik 促凋亡Bik蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Amfebutamone Hydrochloride
phosphoBik(Thr33) 促凋亡Bik蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml (S)Amlodipine
BIRC5/Survivin variant 細(xì)胞凋亡抑制因子5 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml (S)Amlodipine
BK channel BK通道蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tranilast
BMAL1 芳香烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白樣1 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tranilast
BKCa channels/KCNMA 鈣激活通道蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml CEFADROXIL
BMI1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml CEFADROXIL
Japanese encephalitis IgM antibody英文簡稱JEIgM Abβ淀粉樣肽 140（C端） 檢測范圍:685nmol/L
Parkinson disease 2 parkin英文簡稱Park2芳香基硫酯酶K 檢測范圍:686nmol/L8ng/mL
Growth arrest specific protein C英文簡稱GasC醛糖還原酶 檢測范圍:687nmol/L24ng/mL
Leukocyte Immunoglobulin Like ReHZptor Subfamily A, Member 3英文簡稱LILRA3血清白蛋白 檢測范圍:688nmol/L20ng/mL
plagueF1 Antibody英文簡稱plagueF1 Ab活轉(zhuǎn)錄因子4 檢測范圍:689nmol/L
Endothelin Converting Enzyme英文簡稱ECEβ抑制蛋白2/β休止蛋白2 檢測范圍:690nmol/L8ng/mL
leucocyte antigen B27英文簡稱HLAB27炭疽菌（采用活疫苗制備） 檢測范圍:691nmol/L240ng/mL
HLAB1502英文簡稱HLAB1502炭疽桿菌 檢測范圍:692nmol/L
AntiBRF1 RNA polymerase III Antibody英文簡稱AntiPol III腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白 檢測范圍:693nmol/L16ng/mL
Signal Transducer And Activator Of Transcription 4英文簡稱STAT4血管緊張素Ⅱ1A型受體 檢測范圍:694nmol/L1000pg/mL
Hepatitis A virus IgM antibody英文簡稱HAV IgM AbABI1/SSH3BP1蛋白 檢測范圍:695nmol/L40mIU/mL
helicobacter pylori antibody英文簡稱HP Ab酰組蛋白H1b 檢測范圍:696nmol/L3200ng/ml
YFVAg英文簡稱YFVAg酰tRNA合成酶2 檢測范圍:697nmol/L
TFAR19英文簡稱TFAR19絲抑制蛋白激酶C底物 檢測范圍:698nmol/L8ng/ml
antimous antibody英文簡稱HAMA核突觸蛋白α 檢測范圍:699nmol/L800ng/ml
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)SPS基因染料法qPCR試劑盒肝細(xì)胞粘附分子2抗體 英文縮寫：HoxC13
氨基己糖苷酶D抗體 英文縮寫：HOXC4
HHLA2蛋白抗體 英文縮寫：HOXC5
羥脯氨酸抗體 英文縮寫：HOXC6
熱休克蛋白10抗體 英文縮寫：HOXc8
同源盒蛋白PRH抗體 英文縮寫：HOXC9
羥類固醇脫氫酶17β抗體 英文縮寫：HOXD10
皰疹病毒相關(guān)泛素特異性蛋白酶7抗體 英文縮寫：HOXD13
同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體 英文縮寫：HOXD8
異染色質(zhì)蛋白1-α(HP1α)抗體 英文縮寫：HOXD9
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