詳細介紹
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱:神經生長因子免費代測試劑盒
英文名稱:Nerve growth factor
檢測范圍:15.625ng/mL~500ng/mL
貨號:YS-E987953
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
選型:
產品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關聯(lián)的,不能混用其他商的產品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質,此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結果造成任何影響。
7、所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
VERO細胞衍生株;SVPAGAROSEI/TAEBLEND2.0%瓊脂糖 - TAE 混合物 2.0%生物技術級100GRT
OS-RC-2細胞,腎癌細胞 小細胞肺癌,SH-77細胞 腎癌Wilms細胞;G401典化鉍鉀;典化鉍合四典化鉀 BisMuth potcssiuM iodidq 41944-01-8
KM小鼠子瘤株;U145'-ATP,Na25-三嶙酸腺苷二鈉鹽100UBR,98%
ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 細胞裂解液 (陽性對照) 2-甲基吲哚,英文名或英文縮寫:2-metxylindole,級別:BR,48-50℃,規(guī)格:100克
胚胎肺成纖維細胞;WI-38Pectin 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma P9135
SPHK1 Others Human SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) GOLD-N-GELRNADYE,200X12.5mlRT
表皮色素細胞-胎兒HEM-f溴代三(二甲基基)... Bromotris(dimethylamino)phosphonium He... 50296-37-2 1G 通用試劑
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 癌細胞,MCF-7細胞 SPC-A-1(肺腺癌細胞)L-賴安醋 L-Lysinq 26-87-1
卵巢畸胎瘤細胞;PA-1胰胨大豆瓊脂斜面shēng huà shì jì容量:500毫升
ICAM2 Others Human CD102 / ICAM2 細胞裂解液 (陽性對照) N-芴甲氧羰?;?/span>-β-NA
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3鏈霉親和素Streptavidin from Streptomyces avidinii質量規(guī)格:>15Units/mg protein
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) 西他沙星Sitafloxacin Hydrate質量規(guī)格:>98.5%,水合物,BR
食道平滑肌細胞RNAHESMC miRNA5 μgDHBS;3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉DHBS質量規(guī)格:>99%
SLIK6 Others Human SLIK6 細胞裂解液 (陽性對照) BGP;β-甘油1酸鈉水合物(高)Di beta-glycerophosphate pentahydrate質量規(guī)格:>99%,BR,5水合物
臍動脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mLFura 2-AM;鈣熒光探針Fura 2-AM質量規(guī)格:>95%,進口
神經生長因子免費代測試劑盒PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)黃胺酸(>96.5%,BS)質量規(guī)格:>96.5%,BSFlavianic acid hydrate
DPP10 Others Human DPP10 / DPRP3 細胞裂解液 (陽性對照) 酸性品紅鈣(>60%,BS)質量規(guī)格:>60%,BSFuchsin acid calcium salt
大額牛皮膚細胞;BFR-S3血紅素(>95%,BR)質量規(guī)格:>95%,BRHematin
VSTM1 Others Human VSTM1 細胞裂解液 (陽性對照) 聚乙二醇800質量規(guī)格:BRPEG 800
彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL炔雌;炔雌醇環(huán)戊質量規(guī)格:USPQuinestrol
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應,產生可供觀察的顯色反應現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。