詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:脆弱擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Bacteroides fragilisPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
鏈球菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒
豬鏈球菌型PCR檢測(cè)試劑盒
豬鏈球菌通用PCR檢測(cè)試劑盒
嗜熱鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
Goat Anti-rat IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
FOXN1: 叉頭蛋白N1抗體 0.2ml
鼠抗人CD10單克隆抗體 Anti-CD10 0.1ml
Anti-NPY2R/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)肽Y受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PMS2 錯(cuò)配修復(fù)基因PMS2抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-HBsAg/FITC 熒光素標(biāo)記山羊抗人乙肝表面抗原抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 ,英文名: LPL ELISA Kit
小鼠16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouse16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit 96T/48T
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒 Human MIP-5 ELISA Kit
Ratadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脆弱擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒3T3-E1細(xì)胞,鼠胚成骨細(xì)胞 U937(組織細(xì)胞瘤) 山羊皮膚細(xì)胞;WGS1地拉羅司-d4Deferasirox-d4質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)N-去乙基舒尼替尼N-Desethyl Sunitinib質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CW-2(結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N,N-二去乙基舒尼替尼鹽酸鹽N,N-Didesethyl Sunitinib 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
表皮色素細(xì)胞-中色素HEM-m舒尼替尼-d10Sunitinib-d10質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) -13C,D2(主要的)FK-506-13C, D2 (Major)質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。