詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Avian Pathogenicity Escherichia coli(APEC) O1PCR
規(guī)格:50T
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測(cè)試劑盒
多態(tài)小小菌PCR檢測(cè)試劑盒
水貂病毒性腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
莫巴拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
Goat Anti-human IgM/Bio 標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml
FOG2: GATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體 0.1ml
防御素β1抗體 Anti-Defensin β1 0.1ml
Anti-PAX8/FITC 熒光素標(biāo)記配對(duì)盒基因8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-TSC1(Ser505) 0酸化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
小鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFβ ELISA Kit
犬肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineMyoglobin,MYO/MBELISAKit 96T/48T
犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒 Dog adrenomedullin,ADM ELISA Kit
英文名稱(chēng)HumanapoB100ELISAKit人載脂蛋白B100(apoB100)規(guī)格:96T/48T
持久型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10次
Ratheatshockprotein90,hSP-90ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒2-Fluoroadenosine 146-78-1 中文名: 分子式:C10H12FN5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬3(MMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T
2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 122111-01-7 中文名: 分子式:C19H14F2O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒 96T/48T
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 121660-11-5 中文名: 分子式:C19H16FNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬13(MMP-13)ELISA試劑盒 96T/48T
2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde 121660-37-5 中文名: 分子式:C19H14FNO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬-2 英文名稱(chēng): maix metalloproteinase 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): MMP-2
2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline 146578-99-6 中文名: 分子式:C31H25FNOP 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠基質(zhì)金屬-3 英文名稱(chēng): maix metalloproteinase 3 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): MMP-3
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。