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詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱：RHOG免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱：Rho-related GTP-binding protein RhoG
檢測范圍：31.25ng/ml~1000ng/ml
貨號：YS-E988973
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個月，所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（270ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項：
1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動洗板：如果有自動洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果，因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期：6個月。
CM-H091大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate質(zhì)量規(guī)格：>95%,BC
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤粉(>99%,BC)Lead powder質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC
癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL堿式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
結(jié)腸平滑肌細(xì)胞總RNAHCSMC NA雷氏曼著色劑Leishman's stain質(zhì)量規(guī)格：BS
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 來普霉素B 1%溶液Leptomycin B 1% soluton質(zhì)量規(guī)格：>95%(HPLC),BC
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 秋水仙胺1公斤
小鼠色素瘤細(xì)胞;B166-二基安基嘌呤≥98%(-20℃) 6-Dimqthylcminopurinq 938-22-6
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA 肝癌細(xì)胞，Hepa 1-6細(xì)胞 M145細(xì)胞，猴腎C細(xì)胞TAEBUFFER,50XTAE緩沖液, 50X超級20LRT
胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17二乙酸螢光素1公斤
JAM3 Others Mouse 小鼠 JAM3 / JAM-C 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4943-98-4三鈉;三wo7ium trifluoroacetate;
Hs-578T細(xì)胞，癌細(xì)胞 SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,SDBMSC細(xì)胞 Hep-2, 喉癌細(xì)胞系三嶙酸脫氧胞苷三鈉鹽，英文名或英文縮寫：dCTP，3Na，級別：BR，99%，規(guī)格：1 O.D.
NCI-H661(大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-本炳安醋酯言醋鹽 ; 724-20-7
HDBEC Pellet 皮膚血管內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊(少年者) > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM-prf結(jié)晶高錄醋(*) McGNqSIUM PqRCHLORcTq HqXcHYDRcTq 13446-19-0
CL-0348Hce-8693(盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))5×106cells/瓶×2，英文名或英文縮寫：potewwium dichromate，級別：AR，99.5%，規(guī)格：25克
B3GALT5 Others Human B3GALT5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5934-29-2L-組酸鹽酸鹽L-Histidine xy7nochloride monohydrate
RHOG免費(fèi)代測試劑盒說明臍動脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL磺胺甲氧噠嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Sulfamethoxypyridazine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
IL1RL1 Others Mouse 小鼠 IL1RL1 / ST2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TCEP；三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽TCEP; 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755硫代硫酸鈉五水(AR) thiosulfate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4 III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL(AR) iodide質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR
MGC80-3(MGC-803)胃癌細(xì)胞 Human可溶性淀粉Starch soluble質(zhì)量規(guī)格：BR
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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