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詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱：單胞菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱：Pseudomonas spp.PCR
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品：
變異鏈球菌PCR檢測試劑盒
口腔鏈球菌PCR檢測試劑盒
唾液鏈球菌PCR檢測試劑盒
血紅鏈球菌PCR檢測試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
sVEGFR2： 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 0.1ml
FGF19： 成纖維細(xì)胞生長因子19抗體 0.2ml
L-組脫羧酶抗體 hu, mo, rat, bov, dog, pig, chi Anti-L-HDC 0.1ml
Anti-RASSF1A/FITC 熒光素標(biāo)記Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PLC beta3 (Ser537) 0酸化0酯酶Cβ3抗體 規(guī)格 0.1ml
APP695-770/APP17肽 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(17肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
小鼠胚胎干細(xì)胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒 ，英文名： M30 ELISA Kit
小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA檢測試劑盒MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 96T/48T
人肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)免疫試劑盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-IgM ELISA Kit
RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2次
Mousemyeloperoxidase,MPOELISA試劑盒小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
單胞菌通用PCR檢測試劑盒Humen IFN- Beta 人β-干擾素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NTN3/Netrin-3 軸突生長誘導(dǎo)因子3抗體 規(guī)格 0.2ml
rTaq DNA Polymerase 重組Taq DNA 聚合酶 5000 ul
TIGAR 英文名稱： TIGAR蛋白抗體 0.1ml
phospho-Caspase 6 (Ser257) 英文名稱： 0酸化半胱胺酸蛋白6抗體 0.1ml
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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