詳細介紹
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產品屬性:
產品名稱:巨睪前殖吸蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Prosthogonimus macrorchisPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
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實驗過程:
一、試劑準備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 |
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
Streptokinase: 鏈抗體 0.1ml
eIF3K: 真核翻譯起始因子3K抗體 0.2ml
激素受體相關蛋白16抗體 Anti-TRA16 0.2ml
Anti-TRA16/FITC 熒光素標記激素受體相關蛋白16抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB4(Tyr1526) 0酸化整合素β4抗體 規(guī)格 0.1ml
PR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠葡萄糖調節(jié)蛋白78(GRP78)ELISA試劑盒 ,英文名: GRP78 ELISA Kit
小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒MouseEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 96T/48T
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Anti-C-Met/Met/HGFR 肝細胞生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NPTX1 神經細胞正五聚體1抗體 規(guī)格 0.1ml
PGE2 ELISA Kit(mouse) 小鼠前列腺素E2 96T
TKTL1 英文名稱: 酮基移換酶樣蛋白1抗體 0.2ml
C6orf70 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框70抗體 0.2ml
Anti-C-Met/Met/HGFR 肝細胞生長因子受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。