詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:激肽釋放酶10免費代測試劑盒說明
英文名稱:Kallikrein 10
檢測范圍:0.25ng/mL~8ng/mL
貨號:YS-E987569
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期:6個月。
CPA1 Others Human Carboxypeptidase-A1 / CPA1 細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Dibromo-9,9-dimethylfluorene
牙齦成纖維細胞裂解物HGFL2,2'-二溴-9,9,-螺二[9H-芴](>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)2,2'-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]
CD59 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9-二己基芴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene
非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H19752,7-二溴-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene
MHCC97-L細胞,低轉(zhuǎn)移肝癌細胞 小鼠白血病細胞,P388細胞 兔腎細胞;RK-134,5-亞乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione
CD14 Others Rat 大鼠 CD14 細胞裂解液 (陽性對照) xlonofonm錄仿生物技術(shù)級透明無色液體RT不sigma
大鼠骨髓基質(zhì)細胞*培養(yǎng)基 100mL3-叔丁基本酚 99% 3-tqrt-Butylphqnol 282-34-
BV-2小鼠小膠質(zhì)細胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS印度墨汁10只/袋RT
EREG Protein Human 重組 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)RNase&DNase清除劑,英文名或英文縮寫:Rnase&Dnase away,級別:BR,0.3-3.0u/mg,規(guī)格:500克
VE(血管內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)93-58-3本metxyl benzoate;Oil of niobe;Benzoic acid metxyl ester
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 癌細胞溴化乙錠(EB)Ethidium bromide(EB)質(zhì)量規(guī)格:>95%
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KMY0908 破骨細胞*培養(yǎng)基 100mL貝西沙星鹽酸鹽Besifloxacin HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE甜菜堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Betaine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
FUCA1 Others Human FUCA1 細胞裂解液 (陽性對照) 甜菜堿Betaine質(zhì)量規(guī)格:>99%,無水高
腎上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)尿酸Uric acid質(zhì)量規(guī)格:0.99
激肽釋放酶10免費代測試劑盒說明CCL22 Protein Human 重組 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)靈芝酸I(標(biāo)準(zhǔn)品)Ganoderic acid I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) TG100-115TG100-115質(zhì)量規(guī)格:>98%,PI3Kγ/δ抑制劑
低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]鹽酸地芬尼多(標(biāo)準(zhǔn)品)Difenidol 質(zhì)量規(guī)格:供含量測定用
毛發(fā)基質(zhì)細胞(HHZMC)( 5×105 )鹽酸烏拉地爾Urapidil 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CL-0463UM-UC-3(膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2鹽酸烏拉地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Urapidil 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。