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花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白

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更新時間:2023-04-03 10:15:11瀏覽次數(shù):362

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 科研
英文名稱 Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALO 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:單磷酸腺苷脫氨酶3(AMPD3)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 腸細(xì)胞激酶(ICK)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 谷光甘肽合成酶(GSS)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠)

詳細(xì)介紹

相關(guān)產(chǎn)品:

雙特異性磷酸酶9(DUSP9)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 羧酸酯酶1(CES1)活性蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 海藻糖酶(TREH)真核蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 真核表達 性狀:凍干粉

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白

Homo sapiens (Human,人)

凍干粉

原核表達

英文名稱:Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)

LOX15; 15-LOX2; 15-LOX1; 15-LOX; 12-LOX; ALOX15; 15-LO; 15-LPG; LOG15; Lipoxygenase 15; Arachidonate 12-lipoxygenase, leukocyte-type; Arachidonate omega-6 lipoxygenase

酶與激酶 代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:17.3kDa

實際分子量:17kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Lys170~Leu312 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:5.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

1.png

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細(xì)胞(常用的CHOHEK293

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

差異脲原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ureaplasma diversumPCR 50T

產(chǎn)氣腸桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterobacter aerogenesPCR 50T

產(chǎn)酸克雷伯菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Klebsiella oxytocaPCR 50T

腸道病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterovirus(EV)RTPCR 50T

phospho-GSK3 Alpha/ Beta(alpha + beta)(phospho Tyr279 + Tyr216) 0酸化葡萄糖合成3α/β抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse

Rhesus antibody Rh phospho-CREB-1(Ser142) 0酸化CREB-1抗體 規(guī)格 0.1ml

RNA抽提試劑 100ml 國產(chǎn)

ZA20D3 英文名稱: 鋅指蛋白20D3抗體 0.2ml

DLX2 英文名稱: 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX2抗體 0.2ml

SCARB2 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 兔單抗 (PE) Mouse

花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白沿岸單孢子蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Haplosporidium costalePCR

煙曲霉PCR檢測試劑盒 英文名稱; Aspergillus fumigatusPCR

亞洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium asiaticumPCR

亞利桑那沙門氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Salmonella arizonaePCR

注意事項:  

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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