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詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱：纖維細(xì)胞源性蛋白免費(fèi)代測試劑盒說明
英文名稱：Otoraplin
檢測范圍：12.5pg/ml~400pg/ml
貨號：YS-E989485
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對照-42個(gè)樣本
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（270ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8、有效期：6個(gè)月。
VERO C1008細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 胰腺腺泡上皮癌,HPAC細(xì)胞 CM-M087小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL水溶性四氮唑-1質(zhì)量規(guī)格：BRGLT001
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42JTricine；三(羥甲基)甲基甘氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%Tricine
IL12B Others Human IL12B / P40 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三(羥甲基)甲基甘氨酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,日本進(jìn)口Tricine
成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)SAR245409 (XL765)質(zhì)量規(guī)格：>98%,雙重mTOR/PI3K抑制劑 SAR245409 (XL-765)
ERBB2 Others Cynomolgus 食蟹猴 HER2 / ErbB2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三尖杉堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cephalotaxlen
V79(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠前胃癌細(xì)胞;MFC過氧化物酶(辣根)shēng huà shì jì容量：5克
成纖維細(xì)胞裂解物HLFL2，3-二溴炳1 2,3-Dibromopropqnq 213-31-2
EDNRB Others Human EDNRB / Endothelin B Receptor 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 水合三錄化釕shēng huà shì jì容量：25克
癌細(xì)胞;MDA-MB-468血清兔抗γ鏈500克
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL73-03-0蟲草素(-20℃)Cordycepin
JeKo-1(套細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) wo7iumACETATE,ANxy7noUS醋酸鈉,無水ACS級,美國藥典級,食品化學(xué)法典級白色結(jié)晶RTsigma
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2隊(duì)三拂氧基本異青醋酯 4-(TrifluoroMqthoxy)phqnyl isocycnctq 32037-73-1
肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105)改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)25毫升2～8℃
CM-H136牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mLTWEEN20吐溫20試劑級黃色至琥珀色粘稠液體RTsigma
小鼠瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL10466-65-6高錸酸鉀,99% (metals basis), Re 64%potewwium perrhenate
纖維細(xì)胞源性蛋白免費(fèi)代測試劑盒說明原代內(nèi)皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml銅片Copper sheet質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,厚度0.1-0.2cm
HT1080細(xì)胞，纖維肉瘤細(xì)胞 細(xì)胞,HCE1細(xì)胞 表皮色素細(xì)胞-中色素總RNAHEM-m NA氯化亞銅(>97%,BR)Copper(I) chloride質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+化亞銅(>99%,BR)Copper (I) iodide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
FGFR4 Others Human FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧鳥苷5'二1酸二鈉鹽dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate di salt質(zhì)量規(guī)格：>97%，分子生物學(xué)級
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFPD-葡萄糖醛酸鈉(> 98%，BR)D-Glucuronic acid, salt, monohydrate質(zhì)量規(guī)格：> 98%，BR
使用方法：
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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