核糖核酸酶H(RNASEH)重組蛋白

核糖核酸酶H(RNASEH)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：麥芽糖酶糖化酶(MGAM)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 羧肽酶N2(CPN2)重組蛋白 物種； Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 羧肽酶Z(CPZ)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ribonuclease H (RNASEH)

Rnase-H; RNASEH1; RNH1; Ribonuclease H type II

酶與激酶 感染免疫 發(fā)育科學(xué)

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質(zhì)

預(yù)測分子量：62.1kDa

實際分子量：62kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Asp286 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關(guān)產(chǎn)品：

端錨聚合酶1結(jié)合蛋白1(TNKS1BP1)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

谷氨酰tRNA合成酶2(EARS2)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

N-乙酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)重組蛋白 物種； Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后，表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

槍狀肝吸蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Dicrocoelium dentriticumPCR

氣管比翼線蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Syngamus tracheaPCR

普羅威登斯菌通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Providencia spp.PCR

葡萄孢菌PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Botrytis cinerea PCR

大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGFR3 ELISA Kit

Mouse hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 小鼠輕化1(HYD)ELISA試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬10(MMP-10)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanBetacatenin,Beta-CatELISAKit人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白規(guī)格：48T/96T

細胞D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKiesistin大鼠抵抗素規(guī)格：48T/96T

核糖核酸酶H(RNASEH)重組蛋白糞產(chǎn)堿桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Alcaligenes faecalisPCR

糞腸球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enterococcus faecalis PCR

封閉毛細線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Capillaria obsignataPCR

蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Melissococcus plutoniusPCR

注意事項：  

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作