化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品僅用于科研注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 轉(zhuǎn)基因品系番木瓜55-1/63-1 PCR試劑盒 |
英文名稱 | PCR kit for transgenic papaya 55-1 / 63-1 |
貨號 | YSP96775 |
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
產(chǎn)品僅用于科研不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2英文名稱：B-cell leukemia/lymphoma 6,Bcl6英文簡稱Bcl6 檢測范圍:6246nmol/L-1600pg/mL
跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1英文名稱：ATP citrate lyase英文簡稱acly 檢測范圍:8671nmol/L-40mU/mL
跨膜蛋白酶絲氨酸1英文名稱：matrix metalloproteinase 26英文簡稱MMP-26 檢測范圍:5050nmol/L-48ng/mL
跨膜蛋白超家族9-1英文名稱：glycerol 3-phosphate dehydrogenase英文簡稱GPDH 檢測范圍:8481nmol/L-240U/L
跨膜蛋白TMEM176B英文名稱：Muscle-specific actin英文簡稱MSA 檢測范圍:6081nmol/L-240pg/mL
跨膜蛋白TMED4英文名稱：Desmosine英文簡稱DES 檢測范圍:8498nmol/L-16ng/mL
跨膜蛋白Sema3C英文名稱：Streptokinase英文簡稱Lnk 檢測范圍:1354nmol/L-160ng/mL
跨膜蛋白Orai2英文名稱：Urokinase英文簡稱UK 檢測范圍:7130nmol/L-400IU/ML
Eriocitrin 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 E3泛素蛋白連接酶144B/環(huán)指蛋白144B
Eriodictyol 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1
Dendrobine 規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品 胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2
Punicalin 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 整聯(lián)蛋白重復(fù)蛋白3
(−)-HuperzineA 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 一氧化氮合成酶-2（誘導(dǎo)型）
Cyanidin-3-O-glucosidechloride 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 KB抑制蛋白激酶α/β
Carthamine;SafflowerYellow 規(guī)格：色價E(1%)=150;紅花黃色素含量>95% 分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白
L(+)-Rhamnosemonohydrate 規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 白細(xì)胞介素4誘導(dǎo)蛋白1
L(+)-Rhamnosemonohydrate 規(guī)格：≥98%，BR 細(xì)胞間粘附分子4
轉(zhuǎn)基因品系番木瓜55-1/63-1 PCR試劑盒肌肉果糖二磷酸酶抗體 英文縮寫：factor VIII
纖維蛋白原γ鏈抗體 英文縮寫：factor VIII
纖維蛋白肽B抗體（血纖肽B） 英文縮寫：factor VIII
原癌基因c FGR抗體 英文縮寫：Factor VIII B chain
肢體畸形相關(guān)蛋白FHOD1抗體 英文縮寫：Factor VIIIa light chain
磷酸化肢體畸形相關(guān)蛋白FHOD1抗體 英文縮寫：Factor X
纖連蛋白2抗體 英文縮寫：Factor X heavy chain
纖連蛋白7抗體 英文縮寫：Factor XI heavy chain
彈性蛋白結(jié)合蛋白Fcn2抗體 英文縮寫：Factor XI light chain
范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體 英文縮寫：Factor XII heavy chain
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATG隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
化工儀器網(wǎng)