我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
商品介紹:
測(cè)定意義:
蘋(píng)果酸合酶(MS,EC 4.1.3.2)是屬于轉(zhuǎn)移酶中?;D(zhuǎn)移酶的一類,主要存在于植物和微生物中。MS是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,在MS催化下乙醛酸與乙酰反應(yīng)生成蘋(píng)果酸。
測(cè)定原理:
MS催化乙酰CoA和乙醛酸產(chǎn)生蘋(píng)果酸,同時(shí)生成使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、和蒸餾水
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
Y1小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞1ml/T75
RM-1小鼠前列腺細(xì)胞1ml/T75
C6/36幼蚊細(xì)胞1ml/T75
RCFBF兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞1ml/T75
RYTF兔眼Tenon囊成纖維細(xì)胞1ml/T75
N/N1003A(RLE)兔晶體上皮細(xì)胞永生系1ml/T75
PG-4(S+L-)貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞1ml/T75
RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞1ml/T75
NBLE新生牛眼晶體上皮細(xì)胞1ml/T75
NBTF新生牛眼Tenon囊成纖維細(xì)胞1ml/T75
Rca-T鼠舌粘膜鱗癌細(xì)胞1ml/T75
Rca-B鼠頰粘膜鱗癌細(xì)胞1ml/T75
IR983F大鼠骨髓瘤細(xì)胞1ml/T75
Y3-Ag1.2.3大鼠骨髓瘤細(xì)胞1ml/T75
蘋(píng)果酸合酶(MS)測(cè)試盒鷹嘴豆芽A 規(guī)格: 20mg
93-71-0草死;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 規(guī)格: 0.1g
3877-86-9D 規(guī)格: 10mg
2306-27-6甜橙黃;Sinensetin 規(guī)格: 20mg
1324005-51-7(3β,6α,16β,20R,24S)- 規(guī)格: HPLC≥97%;5mg
611-71-2扁桃 規(guī)格: 20mg
63492-69-3紫草;Lithosprmoside 規(guī)格: 20mg
1241-87-81-啡??鼘?規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
81732-46-9班布特羅 規(guī)格: 100mg
6271-21-2二氫石蒜;Dihydrolycorin 規(guī)格: 20mg
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。