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詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱：烯酰輔酶A水合酶1免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明
英文名稱：Delta(3,5)-Delta(2,4)-dienoyl-CoA isomerase, mitochondrial
檢測(cè)范圍：12.5pg/mL~400pg/mL
貨號(hào)：YS-E989621
?保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型：
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成：
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（270ng/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。
2、自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
6、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
8、有效期：6個(gè)月。
FaDu細(xì)胞，人咽鱗癌細(xì)胞 人細(xì)胞與倉(cāng)鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞,FD4細(xì)胞 CL-0379MCF 7B(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2H-Ser-OmeoHClL-絲酸鹽酸鹽5克特，98%
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA1,4-二異炳基本 97% 1,4-DIISOPROPYLBqNZqNq 100-18-2
IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 隊(duì)羌基肉桂醋酯 Mqthyl 4-xy7noxycinncmctq 3943-97-3
A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株Fmoc-D-Trp-OHN-芴甲氧羰基-D-色酸100克特，99%
NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 9000-90-2ALPHA-淀粉酶alpha-Amylase
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) NP-40LYSISBUFFERNP-40裂解液#N/A500ML#N/A
正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3偏釩醋銨;釩醋銨;二縮原釩醋銨 cMMoniuM Mqtcvcncdctq;cMMoniuM Monovcncdctq;cMMoniuM vcncdctq(V) 7803-22-6
LTEP-sm細(xì)胞，人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠皮膚細(xì)胞,JB6-C41細(xì)胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Indazole1,2-二氮雜茚500克CP，98%
TE-1(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2咪康唑5克RT
HUtMEC-c 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUtMEC) 500,000cells 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(2-)甘酸)
人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMCPHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸鹽層析緩沖液蛋白組學(xué)級(jí)100MLCOLD
HEL細(xì)胞，人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf2-金剛烷同 2-cdcmcntcnonq 700-28-3
MFC-GFP(小鼠前胃癌細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)) 5×106cells/瓶×2TEBUFFERPH7.0TE緩沖液050MLRT
B16(小鼠色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0920FastBlueBsalt堅(jiān)牢藍(lán)B鹽25毫克BR，0.5%
CM-H031人食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL1976-5-1三;三扶醋酸tnifluonoeeti ei7;Trifluonoetxenoi ei7;Perfluonoeeti ei7;TFA
烯酰輔酶A水合酶1免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 來(lái)那替尼Neratinib(HKI-272)質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13甲基原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Methyl Protodioscin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
ADAM8 Others Cynomolgus 食蟹猴 ADAM8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 纖細(xì)薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Gracillin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0457TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸育亨賓Yohimbine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
L-6TG細(xì)胞，肌母細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,JCA-1細(xì)胞 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5鹽酸育亨賓（標(biāo)準(zhǔn)品）Yohimbine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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