詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:水貂病毒性腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Mink Enteritis Virus(MEV)PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
相關(guān)產(chǎn)品:
禽正呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒
禽副粘病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒
禽副粘病毒型PCR檢測(cè)試劑盒
禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
Sin3b: 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體 0.2ml
eEF1A2: 翻譯延伸因子EF-1 α2抗體 0.2ml
α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體 Anti-α-ACTN4 0.1ml
Anti-HAS/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記人血清白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FGFR1(Tyr653/654) 0酸化堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2) 二氫酶樣2CRMP2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA試劑盒 ,英文名: gp130/CD130 ELISA Kit
牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineZn-Metallothionein,Zn-MTELISAKit 96T/48T
人8-羥基DNA糖苷酶(OGG1)免疫試劑盒 Human OGG1 ELISA kit
英文名稱MouseIerleukin-16,IL-16ELISAKIT小鼠白介素-16(IL-16)規(guī)格:96T/48T
冰凍切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA試劑盒大鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
水貂病毒性腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒MAP-2(microtubule associated protein 2) 微管相關(guān)蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BRN3A 轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Pectinesterase 果膠酶抗體 規(guī)格 1ml
CD41 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TSHR 英文名稱: 促甲狀腺素受體抗體 0.1ml
CK20 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白20抗體 0.1ml
Anti-BRN3A 轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
儲(chǔ)存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。