詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品具有質(zhì)量可靠、*、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | NAD激酶(NADK)測試盒 |
測定方法 | 微量法、可見分光光度法 |
規(guī)格 | 100管/48樣、50管/24樣 |
貨號 | YS-01J6322 |
商品介紹:
測定意義
NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測定原理
NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
性能:
1. 靈敏度:檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
運(yùn)輸:泡沫箱加冰運(yùn)輸,全國各地快遞免費(fèi)送貨上門。
存儲(chǔ)方式:頻繁使用時(shí)儲(chǔ)存于2~8℃保鮮冷藏,較長時(shí)間不用時(shí)儲(chǔ)存于-20℃,切勿冷凍。
保質(zhì)期限:有效期6個(gè)月,日期、有效期、批號見外包裝。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
Arginase II 酶2抗體 總狀毛霉
AKR1C3 醛固酮還原酶家族1成員C3抗體 多型孢毛霉
ACTHR 促腎上腺皮質(zhì)激素受體 絲球毛霉
AGRP 褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體 球孢毛霉
Adrenodoxin 腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體 直立毛霉
Adracalin Allgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體 兩型孢毛霉
AAV5 capsid protein VP1 腺相關(guān)病毒5 VP1抗體 卷枝毛霉
ALDH3A2 脂肪醛脫氫酶抗體 生香毛霉
AVPR1A 抗利尿激素1A抗體 葡酒色被孢霉
AVPR1B 抗利尿激素受體1B抗體 拉曼被孢霉
ARFGEF2 二磷酸腺苷核糖基化因子酸交換因子2抗體 多頭被孢
ATBF1 α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體 小被孢霉
ATXN10 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體 深黃被孢霉
AKAP7 蛋白激酶A錨定蛋白7抗體 紅曲霉菌
ABCA12 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體 紅色紅曲霉
ABCB9 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體 玉蜀黍長蠕孢
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C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse
細(xì)胞名稱 種屬
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人乳腺癌細(xì)胞 Human
MDA-MB-231(ATCC來源), 人乳腺癌細(xì)胞 Human
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存