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NUP155 155kDa核孔蛋白elisa基本步驟
閱讀:125 發(fā)布時(shí)間:2022-7-51、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本40μL(即樣本5倍);空白對(duì)照孔不加。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。
7、溫育:重復(fù)4的操作。
8、洗板:重復(fù)5的操作。
9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。
10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。
12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以倍數(shù)。
Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體
肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體
脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體
磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)
載脂蛋白E抗體
甲胎蛋白AFP抗體
陰離子交換蛋白2抗體
鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體
載脂蛋白J抗體
載脂蛋白H抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體
AKIRIN2蛋白抗體
ADP核糖基化樣因子8B抗體
三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體
AKIRIN1蛋白抗體
錨定蛋白樣蛋白1抗體
腺苷酸激酶2抗體
精子頂體前體蛋白抗體
黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體
未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體
鐵蛋白Fe65抗體