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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;ss-lgm注意事項(xiàng)
閱讀:164 發(fā)布時(shí)間:2022-9-28小鼠雜交瘤細(xì)胞株;ss-lgm注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
丹參酮IIA-磺酸鈉
丹酚酸A
丹酚酸B
丹酚酸C
丹酚酸D
丹皮酚
膽固醇
膽紅素
膽酸
DL-蛋氨酸(甲硫氨酸)
L-蛋氨酸(甲硫氨酸)
黨參炔苷
α-倒捻子素
β-倒捻子素
地奧司明
地膚子皂苷Ic
地榆皂苷I
地榆皂苷II
碘化木蘭花堿
靛藍(lán)
靛玉紅
丁烯基苯酞
丁香酚
丁香酸
丁溴酸東莨菪堿