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技術(shù)文章

CA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

閱讀:189          發(fā)布時(shí)間:2022-11-14

CA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

淺表層粘膜蛋白多糖抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Lubricin

調(diào)控胚胎干細(xì)胞分化蛋白Lhx2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LHX2

LRRC2蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LRRC2

神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LRRC4B

致盲基因LCA5樣蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LCA5L

致盲基因LCA5蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LCA5

轉(zhuǎn)錄因子LHX6抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LHX6

磷酸化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:phospho-LATS1+LATS2 

轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LBX1

神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子LDB1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LDB1

白細(xì)胞細(xì)胞化學(xué)吸引素2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LECT2

LHX5蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LHX5

單絲氨酸蛋白激酶1+2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LIM kinase 1 + 2

LIN7C蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LIN7C

富含亮氨酸重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LINGO4

富含亮氨酸α2糖蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LRG1

腦特異性磷脂酸磷酸酶樣蛋白1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LPPR4

跨膜蛋白TMEM176B抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LR8

富含亮氨酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LRRTM2

富含亮氨酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:LRRTM4


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