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植物維生素D2(VD2)ELISA免費代測試劑盒技術參數(shù)
閱讀:90 發(fā)布時間:2020-12-25提 供 商 | 上海研生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 13.6KB |
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植物維生素D2(VD2)ELISA免費代測試劑盒說明書
【中文名稱】:植物維生素D2(VD2)ELISA免費代測試劑盒
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【保存條件】:2-8℃低溫保存
【保質期】:6個月,所有試劑盒均提供批次。
【試劑盒成分】:酶標板,試劑,標準品等。ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。 主要用于科研方面,不用于臨床診斷??梢杂糜跈z測各種指標。
植物維生素D2(VD2)ELISA免費代測試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中維生素C(VC)水平。用純化的維生素C(VC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入維生素C(VC),再與HRP標記的維生素C(VC)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素C(VC)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中維生素C(VC)濃度。
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樣本處理及要求
1.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
2. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
3. 不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
1.標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。
4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9.測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
植物維生素D2(VD2)ELISA免費代測試劑盒注意事項
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 試劑盒2-8℃冷藏,保質期6個月。