EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0920培養(yǎng)

EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0920培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全：大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術指導。歡迎廣大科研用戶！

細胞名稱  EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0920培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1：

2傳代；5-6天一次  

傳代情況 P2

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類

EB病毒轉化的人B淋巴細胞；KMY0920培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-YBX-1/FITC 熒光素標記高保留轉錄因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

α-甲基?；o酶A消旋酶抗體 Anti-AMACR/P504S 0.1ml

ZWILCH 英文名稱： 著絲粒ZWILCH蛋白抗體 0.2ml

DEPDC1 英文名稱： 細胞周期調控蛋白SDP35抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Ser722) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1) 趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
uPA ELISA Kit 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Anthrax/FITC 熒光素標記抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM91A1 FAM91A1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1) ELISA Kit 人可溶性細胞間粘附分子1 96T

RNF59 英文名稱： 環(huán)指蛋白59抗體 0.1ml

ACVR1B 英文名稱： 激活素A受體1B抗體 0.2ml

Anti-Anthrax/FITC 熒光素標記抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人膽固醇7α單氧酶(CYP7A1)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA試劑盒，英文名：WNT3A ELISA Kit人粘蛋白12(MUC12)ELISA試劑盒人96T0.625-40 ng/mL大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒，英文名：i-PTH ELISA Kit人膽汁酸受體(Bile acid receptor)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒，英文名：EMAb ELISA Kit人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胱硫醚γ裂解酶(CSE)ELISA試劑盒，英文名：CSE ELISA Kit人β葡糖苷酶2(GLU2B)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒，英文名：ER ELISA Kit人蛋白C(Pro-C)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠SHC轉化蛋白1(SHC1)ELISA試劑盒，英文名：SHC1 ELISA Kit人胰腺再生蛋白1α(REG1α)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠棕櫚?；さ鞍?(MPP6)ELISA試劑盒，英文名：MPP6 ELISA Kit

ELISA Kit for Human Complement decay-accelerating factor小鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒，英文名：17-KS ELISA Kit人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2(Serine/threonine-protein kinase SIK2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL.大鼠細胞周期素D3(CCND3)ELISA試劑盒，英文名：CCND3 ELISA Kit人Slit2 ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠前列腺酸性磷酸酶(ACP3)ELISA試劑盒，英文名：ACP3 ELISA Kit人TNF受體相關因子6(TNF receptor-associated factor 6)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠基質金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒，英文名：MMP11 ELISA Kit人骨保護素(OPG)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅱ(DIO2)ELISA試劑盒，英文名：DIO2 ELISA Kit大鼠β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)ELISA試劑盒，英文名：βACE1 ELISA Kit豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒，英文名：TIMP-1 ELISA Kit
染色液 100ml 自產(chǎn)

ZNF704 英文名稱： 鋅指蛋白704抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CstF64(Ser498) 磷酸化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 規(guī)格 0.1ml

GRB2/ASH peptide 生長因子受體結合蛋白2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DCUN1D2 英文名稱： DCN1樣蛋白2抗體 0.2ml

Oct4 Oct4 鼠單抗 (FITC) Human
CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IGSF3 免疫球蛋白超家族成員3抗體 規(guī)格 0.2ml

AAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit 人抗肌動蛋白抗體 96T

phospho-PI3KCA(Tyr317) 英文名稱： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 0.1ml

CD40L 英文名稱： CD40L抗體 0.1ml

Anti-Phospho-NPM (Ser4) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml