EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022培養(yǎng)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿(mǎn)，光澤度好，*，專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶(hù)！

細(xì)胞名稱(chēng)  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

品牌 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1：

2傳代；5-6天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1022培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Anti-GST-Tag/Biotin 生物素標(biāo)記兔抗重組谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶GST標(biāo)簽蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Anti-gens 3) EB病毒編碼核蛋白-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

醛糖還原酶抗體 Anti-AKR1B1/ADR 0.1ml

ZNF23 英文名稱(chēng)： 鋅指蛋白23抗體 0.1ml

DIS3L 英文名稱(chēng)： 有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-eIF4G(ser1108) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格 0.1ml

EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Anti-gens 3) EB病毒編碼核蛋白-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
UBC(Human urinary bladder cancer antigen) ELISA Kit 人膀胱癌抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HDAC12 組蛋白去乙?；?2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Megsin 絲氨酸蛋白酶抑制劑B7抗體 規(guī)格 0.2ml

DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase) ELISA Kit 人多巴胺-β羥化酶 96T

RDH11 英文名稱(chēng)： 視黃醇脫氫酶11/丙型肝炎病毒核心蛋白抗體 0.2ml

C1orf189 英文名稱(chēng)： 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框189抗體 0.2ml

Anti-HDAC12 組蛋白去乙?；?2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人胞漿非特異性二肽酶(Cytosolic non-specific dipeptidase) ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠β防御素2(β-BD-2)ELISA試劑盒，英文名：β-BD-2 ELISA Kit人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒，英文名：CTX-Ⅰ ELISA Kit人雙重特異性蛋白磷酸酶1(DUSP1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠周期素依賴(lài)性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA試劑盒，英文名：CDKN1A ELISA Kit人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒，英文名：SOCS3 ELISA Kit人IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠溶質(zhì)載體家族30成員7(SLC30A7)ELISA試劑盒，英文名：SLC30A7 ELISA Kit人的谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶ω1(GSTO1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源趨化因子(MDC)ELISA試劑盒，英文名：MDC ELISA Kit人組蛋白H2B型2-E(Histone H2B type 2-E)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠肝素酶(HPA)ELISA試劑盒，英文名：HPA ELISA Kit

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒人96T4.69-300 pmol/L小鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒，英文名：Eotaxin ELISA Kit人白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶3(IRAK-3)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA試劑盒，英文名：SOD3 ELISA Kit人白介素17受體B(IL17RB)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠IL2誘導(dǎo)T細(xì)胞激酶(ITK)ELISA試劑盒，英文名：ITK ELISA Kit脂氧素A4(Lipoxin A4)ELISA試劑盒通用96T31.2-2000 pg/mL大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒，英文名：NAP-2/CXCL7 ELISA Kit人瘦素(LEP)ELISA試劑盒人96T3.12-200 ng/mL大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒，英文名：ACE ELISA Kit人甘露糖結(jié)合蛋白C(MBP-C)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒，英文名：EPI ELISA Kit人神經(jīng)秩蛋白（Neurturin）ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒，英文名：pERK ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注

Vitamin A 英文名稱(chēng)： 維生素A抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 規(guī)格 0.1ml

lamin A 核纖層蛋白A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

phospho-DAXX (Ser213) 英文名稱(chēng)： 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 0.1ml

Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-H1N1/FITC 熒光素標(biāo)記抗流感病毒A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-RACK1/FITC 熒光素標(biāo)記受體激活蛋白激酶C1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BCHE (CT) 丁酰膽堿酯酶抗體(C端) 規(guī)格 0.1ml

AATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪酸激酶抗原 0.5mg

GGT1 英文名稱(chēng)： γ谷酰轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-RACK1/FITC 熒光素標(biāo)記受體激活蛋白激酶C1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml