人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-231培養(yǎng)

人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-231培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細(xì)胞名稱(chēng)  人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-231培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 貼壁生長(zhǎng)　

特征特性 MDA-MB-231是從一名51歲的白人女性乳腺癌患者的胸水中分離建立的。該細(xì)胞表達(dá)表皮生長(zhǎng)因子EGF受體、TGF-α受體和WNT7B癌基因。

培養(yǎng)條件 L15：

Leibovitz Medium 10%FBS  

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）　

STR Amelogenin：X；CSF1PO：12，13；D13S317：13；D16S539：12；D18S51：11，16；D19S433：11，14；D21S11：30，33.2；D2S1338：20，21；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8，9；D8S1179：13；FGA：22，23；TH01：7，9.3；TPOX：8，9；vWA：15，18；

同工酶

染色體 58~61，有巨核

使用權(quán)限 A類(lèi)

人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-231培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Anti-ZNF268(1a)/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白-1a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

錨定蛋白G抗體 Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3 0.1ml

ZNF288 英文名稱(chēng)： 鋅指蛋白288抗體 0.2ml

DLK1 英文名稱(chēng)： 穿膜蛋白DLK1抗體(C端) 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml

Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪氨酸激酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NEP/MME 金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-4R/CD124 白細(xì)胞介素4受體抗體IL-4Rα 規(guī)格 0.1ml

LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體 96T

PRSS8 英文名稱(chēng)： 絲酸蛋白酶8抗體 0.1ml

Claudin 11 英文名稱(chēng)： 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗體 0.1ml

Anti-NEP/MME 金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人白介素17B(IL-17B)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白介素4(IL4)ELISA試劑盒，英文名：IL4 ELISA KiISA Kit for Human Lactadherin大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒，英文名：GP-BB ELISA KiISA Kit for Human Myosin-9大鼠鳥(niǎo)氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒，英文名：OCT ELISA KiISA Kit for Human Nitric oxide synthase, endothelial大鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒，英文名：Collagenase II ELISA KiISA Kit for Human Peripheral myelin protein 22大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)ELISA試劑盒，英文名：MAN1A1 ELISA KiISA Kit for Human Elafin大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒，英文名：IL-4 ELISA KiISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)ELISA試劑盒，英文名：Bcl2-L-1/Bcl-X ELISA Kit

ELISA Kit for Human Inositol monophosphatase 2小鼠S100鈣結(jié)合蛋白(S100)ELISA試劑盒，英文名：S100 ELISA KiISA Kit for Human Sugar transporter SWEET1大鼠孕酮(Pg)ELISA試劑盒，英文名：Pg ELISA KiISA Kit for Human Selenoprotein P大鼠碳酸酐酶Ⅰ(CA1)ELISA試劑盒，英文名：CA1 ELISA Kit人軸抑制蛋白2(Axin-2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA試劑盒，英文名：trypsin ELISA KiISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒，英文名：VB6 ELISA Kit人乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒人96T1.56-100 U/L小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒，英文名：Hsp-60 ELISA KiISA Kit for Human ADP-ribosyl cyclase 2小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒，英文名：Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注

VEGFR3 英文名稱(chēng)： 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Bim(Ser87) 磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 規(guī)格 0.1ml

MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DNAI1 + 2 英文名稱(chēng)： 軸絲中鏈動(dòng)力蛋白抗體 0.2ml

Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-A/H5N1-M2 /FITC 熒光素標(biāo)記A型病毒H5N1-M2蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PAX1/FITC 熒光素標(biāo)記配對(duì)盒基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BCHE(1E8) 丁酰膽堿酯酶單克隆抗體 規(guī)格 0.2ml

ABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1抗原 0.5mg

GAD65 英文名稱(chēng)： 谷酸脫羧酶-65抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格 0.3ml

Anti-PAX1/FITC 熒光素標(biāo)記配對(duì)盒基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml