詳細介紹
人前列腺癌細胞;LNCaP價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 人前列腺癌細胞;LNCaP價格
形態(tài)特性 上皮樣;梭形
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞由Horoszewicz JS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上淋巴結細針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細胞的生長和酸性磷酸酶的產生。該細胞不形成均一的單層而是成簇生長,所以傳代的時候要反復吹打形成單個細胞;該細胞貼壁不牢,達不到匯合狀態(tài),而且會使培養(yǎng)基迅速變酸;傳代后48h內一定要保持培養(yǎng)瓶靜止.如果此時挪動培養(yǎng)瓶,會使大部分細胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況,需要重新孵育24~48h使細胞重新貼壁,細胞貼壁后可更換培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;5~7天1次。
傳代情況 P50
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶
染色體 72~88,XY
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-factor VIII/PE 熒光素PE標記第八因子相關抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Egr-1(Early growth response 1) 早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
血管緊張素I抗體 Anti-Ang I/AT1 0.1ml
ZBTB2 英文名稱: 鋅指蛋白437抗體 0.2ml
DNER 英文名稱: 腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4E(Ser209) 磷酸化真核翻譯起始因子4E抗體 規(guī)格 0.1ml
Egr-1(Early growth response 1) 早期反應基因-1/應急反應生長基因1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCSK9/NARC1 神經(jīng)細胞凋亡調節(jié)轉化蛋白1抗體(前蛋白轉化酶枯草溶菌素9) 規(guī)格 0.1ml
C Kit Human 人 C / SLAMF2 / BCM1 ELISA配對抗體 ELISA
TCF12 英文名稱: 轉錄因子12抗體 0.2ml
CD146 英文名稱: 黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體 0.1ml
Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人β-防御素129(β-DF129)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠載脂蛋白A4(APOA4)ELISA試劑盒,英文名:APOA4 ELISA Kit人卵固蛋白同族物1(Ovostatin homolog 1)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠活化素B(ACV-B)ELISA試劑盒,英文名:ACV-B ELISA Kit人前膠原C內肽酶增強子1(PCPE1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)ELISA試劑盒,英文名:LDL-C ELISA KiISA Kit for Phylloquinone大鼠成纖維生長因子受體底物2(FRS2)ELISA試劑盒,英文名:FRS2 ELISA Kit大鼠α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)ELISA試劑盒,英文名:αHSP ELISA Kit大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒,英文名:HSP90αA1 ELISA Kit豚鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒,英文名:IFNα ELISA Kit
人電子傳遞黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒,英文名:DNASE1 ELISA Kit人腺苷高半胱(AdoHcyase)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒,英文名:apo-B48 ELISA KiISA Kit for Human Interferon-inducible protein AIM2小鼠血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒,英文名:AT2R ELISA Kit人胎盤堿性磷酸酶(ALPP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠瘦素(Leptin)ELISA試劑盒,英文名:Leptin ELISA KiISA Kit for Human Angiopoietin-1小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒,英文名:visfatin ELISA Kit人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒,英文名:TRAb ELISA KiISA Kit for Human Coiled-coil domain-containing protein 82小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)ELISA試劑盒,英文名:CASP-10 ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
VAMP2 英文名稱: 囊泡相關膜蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser602) 磷酸化B-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨細胞病毒UL49抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DOCK7 英文名稱: 胞質分裂專一蛋白7抗體 0.2ml
Anti-AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit 人血管舒緩激肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖體S6蛋白激酶β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HRP2 肝癌衍生生長因子2抗體 規(guī)格 0.2ml
ABM-Ab(Human alveoli basement membrane zone antibody) ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗體 96T
PDGFAA + PDGFBB 英文名稱: 血小板源性生長因子AA+BB抗體 0.1ml
Connexin-29 英文名稱: 間隙連接蛋白29抗體 0.1ml
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖體S6蛋白激酶β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml