人小細胞肺癌細胞；NCI-H209培養(yǎng)

人小細胞肺癌細胞；NCI-H209培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細胞庫細胞株種類齊全：大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細胞名稱  人小細胞肺癌細胞；NCI-H209培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 懸浮聚集生長

特征特性 該細胞由Gazdar AF及其同事于1979年從一名小細胞肺癌患者的骨髓轉(zhuǎn)移灶中分離建立，該骨髓標本的獲取先于患者的治療。該細胞是一種典型的小細胞性肺癌細胞，表達較高水平的4種生化標志：

神經(jīng)特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒有擴增；未發(fā)現(xiàn)大的結(jié)構(gòu)DNA的異常；該細胞合成與正常肺相當(dāng)量的p53 mRNA。該細胞以聚集體的形式懸浮生長，只有聚集體中的細胞是有活力的，但是細胞活率無法估計，一般培養(yǎng)基中含有大量的細胞碎片。該細胞表達異常的RB1蛋白，其706  

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS　

傳代方法 1：

2傳代；5~7天1次。  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14.2，15；D21S11：32.2；D2S1338：17，20；D3S1358：18，20；D5S818：12；D7S820：9；D8S1179：12，13；FGA：20，24；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：18，19；

同工酶

染色體 　

使用權(quán)限 A類
人小細胞肺癌細胞；NCI-H209培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Annexin V/PE 熒光素PE標記兔抗人、大、小鼠、Annexin V抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Anti-phospho-ATF2 0.1ml

ZAN 英文名稱： 透明帶黏附蛋白ZAN抗體 0.2ml

DOCK1 英文名稱： 細胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EIF4B (Ser540) 磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Ki-67 (Proliferation Marker) Ki67蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素 96T

PGF2 alpha 英文名稱： 前列腺素F2a/PGF2 α抗體 0.2ml

C2orf60 英文名稱： 2號染色體開放閱讀框60抗體 0.2ml

Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人β-1,3-半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(β3GALT2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒，英文名：IgA ELISA Kit大鼠β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA試劑盒，英文名：βACE2 ELISA Kit豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒，英文名：CGRP ELISA KiISA Kit for Human Serine--pyruvate aminotransferase小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒，英文名：INS ELISA KiISA Kit for Human Agrin小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒，英文名：STK ELISA KiISA Kit for Human Beta-1, 4-galactosyltransferase 5小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒，英文名：P-PKC ELISA Kit人成纖維生長因子受體1（FGFR-1）ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠凝血因子Ⅸ(F9)ELISA試劑盒，英文名：F9 ELISA Kit

人硫代嗎啉羧化物脫氫酶(CRYM) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒，英文名：Alox5 ELISA KiISA Kit for Human Aspartate aminotransferase, mitochondrial小鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒，英文名：ADAM8 ELISA Kit人次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA試劑盒，英文名：CASP11 ELISA KiISA Kit for Human HDL-cholesterol小鼠端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)ELISA試劑盒，英文名：TEP1 ELISA Kit人干擾素α2(IFN-alpha-2)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白細胞衍生趨化因子2(LECT2)ELISA試劑盒，英文名：LECT2 ELISA KiISA Kit for Human Insulin receptor小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒，英文名：Slit2 ELISA Kit人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒，英文名：PⅢNP ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注

phospho-ZFP36L1(Ser334) 英文名稱： 磷酸化鋅指蛋白36抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R (Tyr723) 磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DeltaD 英文名稱： DeltaD抗體 0.2ml

PPM1A PPM1A / PP2C-alpha 鼠單抗 (PE) Human
FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HHV8/ORF K2 類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MG 雞毒支原體抗體 規(guī)格 0.2ml

AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸環(huán)化酶1 96T

REG1 beta 英文名稱： 胰島細胞再生因子β抗體 0.2ml

C5orf49 英文名稱： 5號染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml

Anti-HHV8/ORF K2 類皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。