詳細(xì)介紹
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1價(jià)格
形態(tài)特性 球形
品牌 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進(jìn)展性惡性黑色素瘤的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細(xì)胞可產(chǎn)生黑色素,電鏡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對(duì)該細(xì)胞系的抗體。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1×105~2×105,每周補(bǔ)液2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:11;D16S539:11,12;D18S51:13,16;D19S433:15,16.2;D21S11:29,32.2;D2S1338:19,23;D3S1358:14,16;D5S818:12,13;D7S820:12;D8S1179:16;FGA:18,20;TH01:6;TPOX:11;vWA:16,17;
同工酶
染色體 53~73,XY
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti- Alpha -HCG/Gold 膠體金離子α 亞基人絨毛膜促性腺激素單抗 IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 Anti-ARFIP2/arfaptin 2 0.1ml
ZFAND5 英文名稱: AN1型鋅指蛋白5抗體 0.2ml
DPP6 英文名稱: 二肽基肽酶6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
ECE2(Endothelin Converting Enzyme 2) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Caspase-1(actived) 天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PD-1/CD279 程序性死亡1抗體 規(guī)格 0.1ml
FCGR2B Kit Human 人 CD32b / FCGR2B ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TSBP 英文名稱: 特異蛋白抗體 0.2ml
Alpha s2 Casein 英文名稱: α-s2酪蛋白抗體 0.2ml
Anti-Caspase-1(actived) 天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
人Spondin 2(SPON2) ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠尿皮質(zhì)素3(UCN3)ELISA試劑盒,英文名:UCN3 ELISA KiISA Kit for Human G-protein coupled estrogen receptor 1小鼠激活素A(ACVA)ELISA試劑盒,英文名:ACVA ELISA KiISA Kit for Human Histone H4小鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)ELISA試劑盒,英文名:ARNT ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-29小鼠白介素22(IL22)ELISA試劑盒,英文名:IL22 ELISA KiISA Kit for Human Interleukin-17A小鼠CD163分子(CD163)ELISA試劑盒,英文名:CD163 ELISA KiISA Kit for Human Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 2大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒,英文名:apo-A1 ELISA KiISA Kit for Human Motor neuron and pancreas homeobox protein 1大鼠纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒,英文名:Plg ELISA Kit
人TATA 結(jié)合蛋白類蛋白1(TBP-like protein 1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠亨廷頓蛋白(HTT)ELISA試劑盒,英文名:HTT ELISA KiISA Kit for Human Microsomal triglyceride transfer protein large subunit大鼠熱休克蛋白70(HSP70)ELISA試劑盒,英文名:HSP70 ELISA KiISA Kit for Human Nestin大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒,英文名:sE-selectin ELISA KiISA Kit for Human Alpha-1-acid glycoprotein 1大鼠胱抑素SN(CST1)ELISA試劑盒,英文名:CST1 ELISA KiISA Kit for Human L-seryl-tRNA(Sec) kinase大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒,英文名:TSH ELISA KiISA Kit for Human Glycogen phosphorylase, brain form大鼠Toll樣受體7(TLR-7)ELISA試劑盒,英文名:TLR-7 ELISA KiISA Kit for Human RPE-spondin大鼠組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒,英文名:CTSD ELISA Kit
尼龍膜(帶正電荷)(15×60cm 0.45um) 1張 Pall-Gelman
ZNF231 英文名稱: 鋅指蛋白231抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser671) 磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 磷酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DDB2 英文名稱: DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
CLU Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J 鼠單抗 (FITC) Human
Anti-GSK-3 Beta(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖合成激酶-3β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PACAP-38 /FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Bcl-xL/BCL2L1/bcl-xs Bcl-xL蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
ACA11 peptide 擬南芥ACA11蛋白多肽抗原 0.5mg
GLUR/glutathione reductase 英文名稱: 谷胱甘肽還原酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RACK1 受體激活蛋白激酶C1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-PACAP-38 /FITC 熒光素標(biāo)記腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml