詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
品牌 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系是1984年由Friedman等建立的;在裸鼠體內(nèi)可以成瘤。該細(xì)胞系中纖維原蛋白、谷氨酰胺合成酶、神經(jīng)元*烯醇酶陽(yáng)性,但神經(jīng)膠質(zhì)纖維蛋白、S-100蛋白陰性;UJ13A單克隆抗體檢測(cè)該細(xì)胞神經(jīng)外胚層抗原陽(yáng)性;c-myc癌基因高表達(dá)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA+1mM丙銅酸鈉
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在 0.4~1×106 cells/ml,每周換液2~3次。
傳代情況 C9
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:11,13;D16S539:12,14;D18S51:12,17;D19S433:13;D21S11:30,31;D2S1338:17;D3S1358:16,18;D5S818:11,12;D7S820:9,13;D8S1179:14;FGA:19,23;TH01:6,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18;
同工酶
染色體 45~48,XY
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
Anti-Gentamicin/Gold 膠體金離子標(biāo)記兔慶大霉素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(35nm-40nm)
DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
銜接蛋白γ抗體 Anti-γ-Adaptin 0.1ml
Z DNA binding protein 英文名稱: Z DNA結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
DULLARD 英文名稱: DULLARD蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser105) 磷酸化雌激素受體β抗體 規(guī)格 0.1ml
DAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促甲狀腺素受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CA II 碳酸酐酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDCD2L/MGC13096 程序性細(xì)胞死亡2抗體 規(guī)格 0.2ml
IL6R Kit Human 人 IL6R / CD126 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TRPM4 英文名稱: 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白4抗體(M亞家族) 0.2ml
CXCL14 英文名稱: CXC趨化因子14抗體 0.1ml
Anti-CA II 碳酸酐酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒,英文名:IL-21 ELISA KiISA Kit for Human Steryl-sulfatase大鼠信號(hào)素3A(SEMA3A)ELISA試劑盒,英文名:SEMA3A ELISA Kit人分泌性卷曲相關(guān)蛋白4(sFRP-4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠絲蛋白結(jié)合LIM蛋白1(FBLIM1)ELISA試劑盒,英文名:FBLIM1 ELISA KiISA Kit for Human NAD-dependent deacetylase sirtuin-2大鼠凝血因子Ⅵ(F6)ELISA試劑盒,英文名:F6 ELISA Kit人類胰蛋白酶γ(Tryptase gamma)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠甲狀腺素受體α(THRα)ELISA試劑盒,英文名:THRα ELISA Kit人胰蛋白酶(Tryptase-1)ELISA試劑盒人96T1.56-100 ng/mL大鼠反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒,英文名:rT3 ELISA Kit人無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員5B(WNT5B)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)ELISA試劑盒,英文名:IL18BP ELISA Kit
人β-防御素1(β-DF1)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒,英文名:HO1 ELISA Kit豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒,英文名:HIS ELISA Kit人腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白(Protein APC)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒,英文名:OSM ELISA Kit人天青殺素(Azurocidin)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒,英文名:GSK ELISA Kit人嗜乳脂蛋白亞科2成員A1(Butyrophilin subfamily 2 member A1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒,英文名:LR/Ob-R ELISA Kit人細(xì)胞色素P450 3A5(Cytochrome P450 3A5)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒,英文名:ACV-A ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白2(C2)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 ng/mL小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒,英文名:SOD ELISA Kit
免疫組化筆 支 進(jìn)口
Wnt6 英文名稱: 信號(hào)通路Wnt6抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-CDK2 (Thr160) 磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
DAAM2 英文名稱: 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子2抗體 0.1ml
Anti-AD7c-NTP 神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD56/NCAM1 CD56抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh P2X2/ATP receptor 嘌呤受體P2X2抗體 規(guī)格 0.1ml
ACBD6 Kit Human 人 ACBD6 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TAAL6 英文名稱: 相關(guān)抗原L6抗體 0.2ml
COLEC11 英文名稱: 凝集蛋白家族11抗體 0.2ml
Anti-CD56/NCAM1 CD56抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml